[发明专利]一种MDCK细胞全悬浮培养的无血清培养基

摘要

本发明公开了一种MDCK细胞全悬浮培养的无血清培养基，所述MDCK细胞全悬浮培养的无血清培养基中，包含有氨基酸部分，维生素部分，无机盐部分和其他添加物部分。本发明的有益效果为：本发明提供的一种MDCK细胞全悬浮培养的无血清培养基，该培养基培养细胞密度高，成分明确，不含动物血清，有利于下游产品的纯化，提高产品品质，且配制和使用方便，适用于流感疫苗和禽流感疫苗的规模化生产。

主权项

一种MDCK细胞全悬浮培养的无血清培养基，其特征在于，所述MDCK细胞全悬浮培养的无血清培养基中，各原料物质的终浓度为：氨基酸部分：L‑丙氨酸              100‑120 mg/L，L‑精氨酸盐酸盐        120‑200 mg/L，L‑天冬酰胺            5‑10 mg/L，L‑天冬氨酸            65‑80 mg/L，L‑半胱氨酸一水合物    10‑45 mg/L，L‑胱氨酸盐酸盐        25‑50 mg/L，L‑谷氨酸              45‑72 mg/L，L‑谷氨酰胺            300‑405 mg/L，甘氨酸                70‑85 mg/L，L‑组氨酸盐酸盐        110‑155 mg/L，L‑异亮氨酸            142‑180 mg/L，L‑亮氨酸              150‑180 mg/L，L‑赖氨酸盐酸盐        150‑250 mg/L，L‑蛋氨酸              45‑80 mg/L，L‑苯丙氨酸            130‑155 mg/L，L‑脯氨酸              30‑72 mg/L，L‑丝氨酸              55‑80 mg/L，L‑苏氨酸              150‑200 mg/L，L‑色氨酸              190‑250 mg/L，L‑酪氨酸二钠盐        50‑90 mg/L，L‑缬氨酸              150‑200 mg/L，维生素部分：生物素                0.001‑0.005 mg/L，氯化胆碱              5‑15 mg/L，D‑泛酸钙              2‑5 mg/L，叶酸                  2‑5 mg/L，烟酰胺                2‑5 mg/L，盐酸吡哆醇            2‑5 mg/L，核黄素                0.1‑0.5 mg/L，盐酸硫胺素            0.1‑0.5 mg/L，肌醇                  5‑20 mg/L，B12维生素             0.5‑1.0 mg/L，无机盐部分：无水氯化钙            70‑120 mg/L，氯化钾                200‑350 mg/L，氯化镁                20‑40 mg/L，无水硫酸镁            30‑50 mg/L，氯化钠                5000‑8000 mg/L，磷酸二氢钠            50‑76 mg/L，磷酸氢二钠            50‑76 mg/L，七水硫酸亚铁          0.1‑0.5 mg/L，九水硝酸铁            0.01‑0.1 mg/L，七水硫酸锌            0.1‑0.5 mg/L，硅酸钠                0.061 mg/L，其余添加物部分：D‑葡萄糖              1000‑5000 mg/L，丙酮酸钠              100‑150 mg/L，磷酸烯醇丙酮酸盐      1‑5 mg/L，亚油酸                0.01‑0.1 mg/L，鞘磷脂                0.5‑1.2 mg/L，大豆卵磷脂            5‑10 mg/L，胆固醇                2‑5 mg/L，硫辛酸                0.1‑0.5 mg/L，1‑甲基组氨酸          1‑5 mg/L，3‑甲基组氨酸          1‑5 mg/L，牛磺酸                50‑70 mg/L，胸苷                  0.1‑0.5 mg/L，腺嘌呤                1‑5 mg/L，胸腺嘧啶              0.01‑0.1 mg/L，腐胺                  0.01‑0.1 mg/L，重组胰岛素            5‑20 mg/L，转铁蛋白              5‑20 mg/L，植物蛋白              1000‑5000 mg/L，酵母粉                200‑2000 mg/L，EGF上皮生长因子      0.1‑0.5 mg/L，碘甲状腺原氨酸        0.001‑0.005 mg/L，PF‑68抗剪切剂        100‑400 mg/L，Anti‑Clumping细胞分散因子 100‑400 mg/L，将所用物质均以注射用水充分溶解后加入2000mg/L碳酸氢钠，并用1N氢氧化钠或1N盐酸调pH值至7.1‑7.3。