[发明专利]亨廷顿蛋白的酰基化修饰方法有效
申请号: | 201310555256.4 | 申请日: | 2013-11-11 |
公开(公告)号: | CN103601798A | 公开(公告)日: | 2014-02-26 |
发明(设计)人: | 王喆明 | 申请(专利权)人: | 杭州璞题生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C07K1/107;C12N15/70 |
代理公司: | 杭州华知专利事务所 33235 | 代理人: | 宁冈 |
地址: | 311121 浙江省杭州市余杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种亨廷顿蛋白的酰基化修饰方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)获取重组蛋白Htt(1-90):a、亨廷顿蛋白基因的获得;b、重组表达质粒pTWIN1-htt的构建;c、表达亨廷顿蛋白的重组大肠杆菌菌株DH5α-htt的构建;d、重组蛋白的表达;(2)重组蛋白Htt(1-90)的纯化;(3)SPPS方法获得酰基化修饰的Htt(Cys-K92-K158)多肽;(4)Htt(Cys-K92-K158)多肽的纯化;(5)Htt(Cys-K92-K158)多肽与重组蛋白Htt(1-90)经过偶联获得经酰基化修饰目的蛋白Htt(1-158);(6)经酰基化修饰目的蛋白Htt(1-158)的纯化。通过对亨廷顿蛋白的酰基化化学修饰,乙酰化处理后的蛋白水解程度较小,而非乙酰化蛋白水解程度较大,即说明了乙酰化修饰后的亨廷顿蛋白稳定性较强。 | ||
搜索关键词: | 亨廷顿 蛋白 酰基化 修饰 方法 | ||
【主权项】:
一种亨廷顿蛋白的棕榈化修饰方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)、获取重组蛋白Htt(1‑90):a、亨廷顿蛋白基因的获得;b、重组表达质粒pTWIN1‑htt的构建;c、表达亨廷顿蛋白的重组大肠杆菌菌株DH5α‑htt的构建;d、重组蛋白的表达;(2)、重组蛋白Htt(1‑90)的纯化;(3)、SPPS方法获得棕榈化修饰的Htt(Cys‑K92‑K158)多肽;(4)Htt(Cys‑K92‑K158)多肽的纯化;(5)Htt(Cys‑K92‑K158)多肽与重组蛋白Htt(1‑90)经过偶联获得经棕榈化修饰目的蛋白Htt(1‑158);(6)经棕榈化修饰目的蛋白Htt(1‑158)的纯化。
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