[发明专利]发酵液中黄腐酸含量的测定方法

摘要

本发明发酵液中黄腐酸含量的测定方法，该方法包括：1）发酵液中糖的测定；2）发酵液中总黄腐酸的测定；3）发酵液中纯黄腐酸含量的计算：①根据葡萄糖为与黄腐酸对应的线性关系，计算葡萄糖相当于黄腐酸的量；②以葡萄糖质量为横坐标X，对应黄腐酸质量为纵坐标Y作图得到工作曲线和线性回归方程为Y=aX+b,其中a为斜率，b为截距，将样品中的含糖量折合成黄腐酸的量，再用总黄腐酸量减去糖折合成黄腐酸的量比发酵液样品的总量，即为发酵液中纯黄腐酸的百分含量。采用本发明方法能准确测定发酵液中的黄腐酸的含量。

主权项

发酵液中黄腐酸含量的测定方法，该方法包括以下步骤：1）发酵液中糖的测定：将发酵液样品的水溶性糖经热稀酸彻底水解后转化成还原糖，再用费林试剂A、B与还原糖共沸、生成氧化亚铜沉淀，以次甲基蓝为指示剂、用发酵液样品滴定沸腾状态的溶液、达到终点时、稍微过量的还原糖将次甲基蓝还原成无色为终点，依据葡萄糖标准滴定液的消耗量求得还原糖的含量；发酵液样品中还原糖含量X以葡萄糖计按下式计算： X = C 1 ( V 1 - V 2 ) × D 1 m 1 × 100 % 式中：C1——葡萄糖标准溶液浓度，g/ml；V1——空白滴定时耗用葡萄糖标准液体积，ml；V2——样品滴定时耗用葡萄糖标准液体积，ml；D1——样品稀释倍数；m1——样品称取量，g；2）发酵液中总黄腐酸的测定：先用焦磷酸钠提取液提取发酵液样品中的包括糖的腐植酸，再用酸沉淀除去棕腐酸和黑腐酸，用定量的重铬酸钾和硫酸溶液氧化试样中的有机碳，剩余的重铬酸钾用硫酸亚铁标准滴定溶液滴定，以试剂空白为基准，根据试样氧化前后氧化剂消耗体积之差，计算出有机碳含量，经过碳系数的换算得到总黄腐酸含量，样品中总黄腐酸含量W按下式计算： W = C ( V 3 - V 4 ) × 0.003 × 1.3 × D 2 m 2 × K × 100 式中：C——硫酸亚铁标准滴定溶液浓度，mol/L；V3——空白实验时，消耗硫酸亚铁标准滴定溶液体积，ml；V4——测定试样时，消耗硫酸亚铁标准滴定溶液体积，ml；1.3——氧化校正系数；0.003——与1.00ml硫酸亚铁标准滴定溶液[C(FeSO4)=1.000mol/L]相当的以克表示的碳的质量；D2——测定时试样溶液的稀释倍数；m2——试样的质量，g；K——不同煤种黄腐酸碳系数（风化煤0.64、褐煤0.58、泥炭0.51、河南巩义风 化煤0.55、广东湛江泥炭0.46、吐鲁番风化煤0.51）；3）发酵液中纯黄腐酸含量的计算：①根据葡萄糖与黄腐酸对应的线性关系，计算葡萄糖相当于黄腐酸的量m： m = C ( V 0 - V 7 ) × 0.003 × 1.3 K 式中：m——黄腐酸质量（g）；C——FeSO4标准滴定溶液浓度，mol/L；V0——空白耗用FeSO4标准滴定溶液体积，ml；V7——样品耗用FeSO4标准滴定溶液体积，ml；1.3——氧化校正系数；0.003——与1.00ml FeSO4标准滴定溶液相当的以克表示的碳的质量；K——不同煤种黄腐酸碳系数（风化煤0.64、褐煤0.58、泥炭0.51、河南巩义风化煤0.55、广东湛江泥炭0.46、吐鲁番风化煤0.51）；②以葡萄糖质量（g）为横坐标X，对应黄腐酸质量（g）为纵坐标Y，作图得到工作曲线和线性回归方程为Y=aX+b,其中a为斜率，b为截距，将样品中的含糖量折合成黄腐酸的量，再用总黄腐酸量减去糖折合成黄腐酸的量比发酵液样品的总量，即为发酵液中纯黄腐酸的百分含量。