[发明专利]巨大芽孢杆菌亚硝酸盐还原酶共表达载体及其构建方法无效
申请号: | 201310571824.X | 申请日: | 2013-11-13 |
公开(公告)号: | CN103614404A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 周培;冯海玮;时唯伟;支月娥;刘群录;陆伟;初少华;孙玉静;卫星 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/66;C12N1/21;B09C1/10;C12R1/11 |
代理公司: | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人: | 王毓理;王锡麟 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 一种基因工程技术领域的巨大芽孢杆菌亚硝酸盐还原酶共表达载体及其构建方法,首先测定巨大芽孢杆菌全基因组序列作为模板,根据设计出的PCR引物扩增出含有酶切位点亚硝酸盐还原酶大亚基(Bm-Nas D)和小亚基(Bm-Nas E)的基因序列,并依次连接到共表达载体pETDuet-1上,通过菌落PCR技术挑选含有目的基因片段的大肠杆菌DH5α的阳性克隆。本发明克服现有技术中由于亚硝酸盐还原酶小亚基基因序列在天然的巨大芽孢杆菌中表达量非常低,严重限制使用效果,实现极大的提高该基因的表达量。 | ||
搜索关键词: | 巨大 芽孢 杆菌 亚硝酸盐 还原酶 表达 载体 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种巨大芽孢杆菌亚硝酸盐还原酶共表达载体,其特征在于,其核苷酸序列由亚硝酸盐还原酶大亚基Bm‑Nas D,如Seq ID No.1所示,以及亚硝酸盐还原酶小亚基Bm‑Nas E,如Seq ID No.2所示组成。
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