[发明专利]一种重组Taq DNA聚合酶及其制备方法有效
申请号: | 201310576003.5 | 申请日: | 2013-11-18 |
公开(公告)号: | CN103602643A | 公开(公告)日: | 2014-02-26 |
发明(设计)人: | 刘涛;马秀芬 | 申请(专利权)人: | 青岛思能基因生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12R1/01 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266003 山东省青岛市市南区红岛*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及基因工程技术领域,具体是一种制备水生栖热菌(Thermusaquaticus)TaqDNA聚合酶基因重组表达酶的方法。该基因核苷酸序列及编码蛋白质的氨基酸序列分别为SEQIDNO:1和SEQIDNO:2。本发明通过基因克隆技术克隆出基因序列,构建原核表达载体,利用已构建的TaqDNA聚合酶基因的重组菌株,利用LB培养液进行悬浮,37℃培养4.5小时后,加入终浓度为0.5mM的IPTG诱导16-20小时,离心收集菌体后使用2-4mg/ml溶菌酶解离得到蛋白液,通过层析柱和透析袋过滤,得到高纯度活性蛋白TaqDNA聚合酶。与现有技术相比,本发明生产工艺稳定性好,得到的TaqDNA聚合酶活力高,可有效地保证产品产量和纯度,用于基因PCR扩增效果良好。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 taq dna 聚合 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种重组Taq DNA聚合酶,其特征在于,其蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
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