[发明专利]粉葛组织培养快速育苗方法

摘要

本发明涉及植物组织培养繁殖技术领域，一种粉葛组织培养快速育苗方法，包括如下步骤：（1）预处理；（2）无菌材料体系的建立；（3）诱导培养；（4）芽的增殖；（5）生根培养；（6）炼苗移栽；本发明的粉葛组织培养快速育苗方法，应用组织培养方法，可以有效的保持优良母本的稳定性状。与常规的扦插和压条繁殖相比，组织培养能够用较少的优良母本，繁殖出大批量的种苗。在同一时间段内（60d），扦插每个母本只能繁殖出一个有效苗，组织培养的繁殖系数是扦插的的20～30倍。

主权项

一种粉葛组织培养快速育苗方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）预处理将优株块根进行盆栽，放置在温室大棚中，待其发出芽藤蔓长至20cm，开始喷洒1%多菌灵溶液，每周一次，持续一个半月，藤蔓长至1m时开始取材；（2）无菌材料体系的建立选取当年生粉葛葛藤，剪去叶片和叶柄，切割成1.0～1.5cm长带有腋芽的茎段，将带芽茎段置于自来水下冲洗30min，然后用洗衣粉液浸泡10～30min，用软刷刷洗茎段后再置流水下冲洗1～2h，在超净工作台上，将洗涤好的茎段用质量浓度为75％酒精浸泡15～20s，无菌水冲洗2～4次，然后用0.1％的氯化汞浸泡3～5min，无菌水冲洗4～6次再用2%次氯酸钠处理8～10min，无菌水冲洗4～6次，用滤纸吸干带芽茎段获得无菌材料；（3）诱导培养将上述步骤获得的无菌带芽茎段先接种到1/2MS培养基上，黑暗条件下培养10～15d，减少褐化发生，然后转入芽诱导培养基上促进腋芽的萌发和生长，按光照和黑暗时间比为2:1交替进行诱导培养；（4）芽的增殖芽诱导培养25±2d，腋芽萌发生长至1～1.5cm，将其全部转入增殖培养基进行反复增殖，获得大量的增殖苗后转入生根培养；（5）生根培养从增殖培养中选取2～3cm的芽进行生根培养；（6）炼苗移栽将生根培养的组培苗从培养室取出，将培养瓶移到温室中进行强光闭瓶练苗6～8d，然后打开瓶口，在瓶内加入PP333与多菌灵混合液，防止细菌污染以及促进壮苗，再放置7～10d，炼苗完成后，用镊子将试管苗轻轻取出，放入清水盆中，小心洗去根部琼脂，然后涝出，用多菌灵处理后移栽至营养土中，营养土上层为2cm河沙，下层为4cm珍珠岩、蛭石及腐殖质混合物，待有新叶长出后按常规苗圃育苗措施管理。