[发明专利]一种高脂松树茎段组培芽诱导和增殖培养的方法

摘要

本发明公开了一种高脂松树茎段组培芽诱导和增殖培养的方法，将高脂松树嫩枝茎段灭菌消毒后，接入初代培养基中，在温度7-10℃暗培养5-7d，温度20-25℃培养50-60d形成初代芽；将初代芽转入增殖培养基内，温度17-20℃培养5-7d后，温度20-25℃培养15-20d形成增殖芽丛，芽丛转入伸长培养基中，温度17-20℃培养5-7d，温度20-25℃培养18-22d，芽增殖和伸长交替培养。该方法能有效遏制继代芽的褐化，使芽健康增殖，平均增殖系数6.95以上，芽伸长快，并且长势良好，经过多代培养增殖系数稳定，达到继代芽快速扩繁的目的，具有较好的经济效益和社会效益。

主权项

一种高脂松树茎段组培芽诱导和增殖培养的方法，其特征在于：组培茎段选择与处理、组培芽诱导、继代增殖扩繁、丛生芽伸长和壮芽培养等组培技术体系，获得优质高脂松树芽，其操作步骤如下：（1）组培茎段选择与处理  高脂松树的组培茎段芽选自年产松脂4‑4.5kg/a.株的高脂松树穗条嫁接成活的植株，剪取春季萌发的半木质化嫩枝稍，长6‑10cm,用苯扎溴铵按常规方法清洗，然后用自来水冲洗十浸泡15min，洗去嫩枝稍上的尘埃和苯扎溴铵，再将嫩枝稍裁成1‑2cm长的茎段，视木质化程度分类置放容器内，用0.1%新吉尔灭浸泡10‑15min，在无菌条件下，用0.15%HgCl2灭菌消毒3‑5min，无菌水冲洗3‑4次，再用0.1%HgCl2灭菌消毒4‑6min，无菌水冲洗4‑5次后，将灭菌消毒的茎段放在无菌滤纸上将水吸干；（2）组培芽诱导将无菌茎段放入诱导培养基中进行组培芽诱导，组培芽诱导的方法是：先置温度7‑10℃的环境,暗培养5‑7d，再转入温度20‑25℃,光照强度1200‑2000lux,光照12‑14h/d条件下培养50‑60d，形成初代芽；（3）芽继代增殖扩繁将初代芽接入增殖扩繁培养基中进行继代增殖扩繁，继代增殖扩繁控制温度17‑20℃光照强度2000‑4000lux，光照10‑14h/d，培养5‑7d，再在温度20‑25℃，光照强度2000‑4000lux，光照10‑14h/d的条件下培养15‑20d，经2‑3次继代增殖扩繁周期形成丛生芽,平均增殖系数6.95以上；（4）丛生芽伸长将高＜1cm的芽丛接入伸长培养基中进行丛生芽伸长，丛生芽伸长控制温度17‑20℃，光照强度2000‑4000lux，光照10‑14h/d，培养5‑7d，再在温度22‑25℃，光照强度2000‑4000lux，光照10‑14h/d的条件下培养20‑25d，得到长2‑3cm的伸长丛生芽；（5）壮芽培养将高≥2cm的单芽切下，插入壮芽培养基中，温度20‑25℃，光照强度2000‑4000lux，光照10‑14h/d，培养壮芽；将＜1cm的芽丛，接入继代增殖扩繁培养基中，继续进行丛生芽的增殖扩繁培养。