[发明专利]一种疏血通注射液的抗凝血酶活性测定方法

摘要

本发明提供了一种可以有效测定疏血通注射液抗凝血酶活性的方法，其特征在于，采用白瓷点滴板为反应载体，控制凝血酶滴定间隔时间、凝血酶浓度、搅拌针搅拌频率，保证测定结果的稳定。本发明为疏血通注射液提供了一种生物学质控方法，有助于评价其质量的可靠性和可控性。

主权项

一种疏血通注射液的抗凝血酶活性测定方法，其特征在于该方法包括下列步骤：所述疏血通注射液用如下方法制得：将水蛭和地龙分别用2～4倍体积的生理盐水浸渍，反复冻融提取15～30小时，多次过滤，以体积百分数计算，将33％～84％的水蛭生理盐水提取液与16％～67％的地龙生理盐水提取液的比例混合。(1)精密量取疏血通注射液适量，浓缩富集至一定浓度，作为供试品溶液；(2)精密量取供试品溶液10～200μl，置适宜白瓷点滴板中，加入含纤维蛋白原的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液(pH5.0～10.0)20～400μl，搅匀，置水浴(30～45℃)温热0～30min；(3)滴加每1ml中含5～50单位的凝血酶溶液(边滴加边轻轻搅匀)至出现整块可挑起透明凝胶状沉淀，记录消耗凝血酶溶液的体积；(4)按下式计算抗凝血酶活性：U=C1V1／(C2V2)；式中U‑‑每1ml疏血通原液中含凝血酶活性单位，U／ml；C1‑‑凝血酶溶液的浓度，U／ml；C2‑‑供试品溶液的浓度，ml原液·ml‑1；V1‑‑消耗凝血酶溶液的体积，μl；V2‑‑供试品溶液的加入量，μl；中和一个单位的凝血酶的量，为一个抗凝血酶活性单位。