[发明专利]磁性分子印迹聚合物-荧光分析方法有效
申请号: | 201310598535.9 | 申请日: | 2013-11-22 |
公开(公告)号: | CN103558203A | 公开(公告)日: | 2014-02-05 |
发明(设计)人: | 王静;王淼;佘永新;杜欣蔚;王珊珊;金芬;邵华;金茂俊;李腾飞 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N1/28;G01N1/38 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 侯静 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 磁性分子印迹聚合物-荧光分析方法,本发明涉及分析方法。本发明要解决现有快速检测方法中小分子天然抗体难以制备的问题。方法:一、制备包覆聚乙二醇及油酸的磁性纳米粒子;二、制备三嗪类农药磁性分子印迹聚合物;三、采用荧光分光光度计测定荧光信号。本发明用磁性分子印迹仿生材料,替代了一般快速检测方法中常用但难以制备的天然抗体,借助农药分子与荧光探针对磁性印迹的竞争结合,从技术上实现了三嗪类小分子农药的非免疫法快速检测。本发明用于快速检测三嗪类农药残留。 | ||
搜索关键词: | 磁性 分子 印迹 聚合物 荧光 分析 方法 | ||
【主权项】:
磁性分子印迹聚合物‑荧光分析方法,其特征在于磁性分子印迹聚合物‑荧光分析方法,具体是按照以下步骤进行的:一、将FeCl3·6H2O和FeSO4·7H2O溶解在100mL去离子水中,在氮气保护条件下,水浴加热至温度为60℃~70℃,加入碱溶液至生成黑色沉淀,在搅拌条件下保持20min~40min,再加入聚乙二醇和油酸,得到修饰后的磁性纳米粒子;其中,FeCl3·6H2O的质量为2.7g,FeSO4·7H2O的质量1.7g,碱溶液的浓度为的1.0mol/L,聚乙二醇的质量为1g,油酸的体积为2mL;二、将1mmol扑灭津、4mmol甲基丙烯酸、2mL溶剂和30mL致孔剂混合,超声处理30min,在避光条件下控制温度为4℃,保持10h~12h,再向体系中加入2mL交联剂和0.2g步骤一得到的修饰后的磁性纳米粒子,混合均匀,通氮气15min,然后加入30mg引发剂,密封,控制水浴温度为60℃、转速为200rpm,振荡12h,再采用外加磁场对进行磁吸附分离,将分离出的沉淀物质冷却至室温,采用洗脱液进行反复洗涤,至高效液相色谱/质谱检测不到上清液中有模板分子残留后,再分离出沉淀物,在真空干燥条件下,烘干,得到三嗪类农药磁性分子印迹聚合物;三、将10mg步骤二得到的三嗪类农药磁性分子印迹聚合物加入0.5mL5‑(4,6‑二氯三嗪基)氨基荧光素乙醇溶液中,再与0.25mL三嗪类农药阿特拉津标准品的乙醇溶液混合,在室温条件下振荡孵育1h,再采用磁力架吸附30s,然后吸取100mL上清液,再用3mL乙醇稀释,然后采用荧光分光光度计测定荧光信号,控制激发波长为336nm,并于515nm的检测荧光发射波长,完成磁性分子印迹聚合物‑荧光分析方法。
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