[发明专利]一种北虫草的栽培方法

摘要

本发明属于真菌栽培的技术领域，为了使北虫草中虫草素含量提高并稳定在1.7%‑2.5%，提供了一种北虫草的栽培方法。通过北虫草菌种的制备、液体北虫草菌种的制备、北虫草的栽培等步骤，将北虫草栽培于用小麦、燕麦、稻谷为培养基主料，以蛋白胨、蚕蛹粉、蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾为辅料配成溶液制备而成的栽培基中，经过一定的培养条件培养，得到北虫草子实体。采用本发明所述方法收获的北虫草子实体虫草素含量较高，达1.7%‑2.5%，并且稳定在2%左右；本发明所述方法对北虫草菌种的选择具有随意性，可以选择任意北虫草菌种的1‑2代母种，无论是自己分离获得或异地购买所得，或者是保藏菌种，均可投入使用。

主权项

1.一种北虫草的栽培方法，其特征在于：包含以下步骤：(1)固体北虫草菌种的制备：A、加富固体培养基配方：去皮马铃薯150-200g、蔗糖15-20g、蛋白胨1-5g、鸡蛋全液7-10g、琼脂18-20g、维生素B10.2-0.3g、硫酸镁0.2g、水1000ml；B、制备方法：根据需要配制的数量按比例分别称取上述配方原料，去皮马铃薯切块后煮沸25-35min，过滤，上清液中加入维生素B1、蔗糖、硫酸镁、鸡蛋全液、蛋白胨和琼脂，加水定容至1L分装后121℃灭菌20-25min； C、接种：将北虫草母种接种于加富固体培养基的平板或斜面上，20℃±1℃，避光培养7-10天，待菌丝长满平板或斜面并且浓白微黄时取出备用；(2)液体北虫草菌种的制备：A、液体培养基的配方：去皮马铃薯150-200g、蔗糖15-20g、鸡蛋全液3g-5g、维生素B10.2-0.3g、洋葱10-15g、胡萝卜5-10g、蛋白胨1-5g、鲜北虫草子实体10-12g、水1000ml；B、制备方法：鲜北虫草子实体粉碎，去皮马铃薯、洋葱、胡萝卜切块，处理好的四种原料同时煮沸25-35min，过滤，滤液中加入蔗糖、蛋白胨、维生素B1和鸡蛋全液煮沸，加水定容至1L，分装后121℃灭菌20-25min；C、接种将备用的固体北虫草菌种接入液体培养基表面，20℃±1℃静置避光培养48h，100-120rpm，18-20℃，湿度为60%-65%的摇床培养5-7天，当液体培养基中布满菌丝后取出置于4℃冰箱中备用；(3)北虫草的栽培：A、栽培基的配方：主料为小麦、燕麦、稻谷各1/3混合，辅料为：蛋白胨55-60g，蚕蛹粉7-10g，蔗糖8-10g，硫酸镁0.4g，磷酸二氢钾0.4g，水1000ml；B、制备方法：主料的各原料混合，用水洗净，晾干水分，分装于500ml容积的培养瓶中，每瓶30g；辅料溶液的制备：取蛋白胨、蚕蛹粉、蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾加入水煮沸使其溶解，过滤后滤液加水定容至1L备用；每个装有主料的培养瓶中加入辅料溶液42ml混匀后聚丙烯薄膜封口，121℃灭菌1-1.5h，冷却后，置于无菌室中备用；C、接种、培养：将4℃冰箱中保存的液体菌种置于无菌室恢复4-5h，每个培养瓶中接种5-8ml恢复的液体菌种，封口后放入温度为18-20℃、湿度为60-65%的培养室中避光培养30-35天，当菌丝长透培养基后再延长12h进入催芽阶段；D、催芽：培养室的控制条件为：23-24℃、200lx白光光照12h，15-16℃、暗室12h，光照与暗室温差为8-9℃，湿度为80%-95%；以白光光照12h暗室12h为一天如此交替，每天白光光照前和暗室培养前分别通风1次，每次30min；当子实体长出0.5-1cm完成催芽进入催草阶段；E、催草：先在封口的塑料膜上扎3-5个1.5mm的孔作为透气孔；催草阶段培养室的控制条件为：光照温度23-24℃，暗培养温度为18-20℃，湿度为85%-95%，每天白光光照前和暗室培养前分别通风1次，每次30min，光照为白光光照：500lx照射5h，1500lx照射3h，3500lx照射2h，5000lx照射1h，6000lx照射1h，依次交替进行培养10-15天，当子实体顶端长出毛刺，形成子囊孢子时催草培养完成；F、紫外线照射：催草培养完成后去掉培养瓶上的塑料膜，用垂直距离为30-40cm的30W紫外光灯照射90s，然后以200lx的白光每日照射12h，培养1-3天；G、收获：紫外光照射培养1-3天后，观察到子实体上长出毛刺，收割子实体，60℃烘干。