[发明专利]气相色谱-质谱检测发酵液中氨基酸、糖的方法无效
| 申请号： | 201310652827.6 | 申请日： | 2013-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN103792312A | 公开（公告）日： | 2014-05-14 |
| 发明（设计）人： | 陈东;梁远雄 | 申请（专利权）人： | 柳州联海科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/88 | 分类号： | G01N30/88;G01N30/06 |
| 代理公司： | 广西南宁汇博专利代理有限公司 45114 | 代理人： | 邓晓安 |
| 地址： | 544130 广西壮族自治区柳州*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种气相色谱-质谱检测发酵液中氨基酸、糖的方法，属于生物化学检验测定技术领域。本发明检测方法步骤包括：（1）取发酵液，高速离心，分别收集细胞和细胞外液；（2）发酵液样品制备：取步骤1）得到的上清液加入乙腈除去蛋白，涡旋振荡，再离心收集上清液Ⅲ，加入内标物核糖醇溶液，室温真空烘干，得到细胞外液样品Ⅱ；（3）样品衍生，加入糖衍生剂、氨基酸衍生剂；（4）气相色谱-质谱分析和数据采集。本发明具有样品处理简单，操作简便，检测氨基酸、糖时间短，灵敏度高，检测结果重复性高，可实现多个样品制备等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 色谱 检测 发酵 氨基酸 方法 | ||
【主权项】：
一种气相色谱‑质谱检测发酵液中氨基酸、糖的方法，其特征在于，检测方法步骤包括：（1）取发酵液，高速离心，分别收集菌体和上清液Ⅰ；（2）发酵液样品制备：取60~350ul步骤1）得到的上清液Ⅰ，在清液Ⅰ中加入乙腈除去蛋白，上清液Ⅰ与乙腈体积比为1:0.5~1.5，涡旋振荡，再离心收集上清液Ⅲ，加入内标物核糖醇溶液，上清液Ⅲ体积与内标物核糖醇重量比例为50~300ul：20μg，室温真空烘干，得到细胞外液样品Ⅱ；（3）样品衍生：在步骤2）得到的样品Ⅱ中，分别加入50~150ul糖衍生剂，恒温放置1.5~4h，再分别加入50~150ul氨基酸衍生剂，恒温放置过夜，衍生完毕，离心衍生后的样品Ⅱ，收集上清得到待测胞内样品Ⅱ；（4）利用气相色谱‑质谱对步骤3）得到的待测胞内样品Ⅱ，进行分析和数据采集。
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