[发明专利]一种茶树RNA提取方法无效
| 申请号： | 201310654955.4 | 申请日： | 2013-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN103667259A | 公开（公告）日： | 2014-03-26 |
| 发明（设计）人： | 李叶云;添先凤;周月琴;江昌俊 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人： | 胡敏 |
| 地址： | 230001 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种茶树RNA提取方法，步骤包括：取茶树组织，加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮PVPP，液氮研磨成粉末，加入提取液，水浴并离心，获得的上清液中加入无水乙醇，沉淀RNA，再用吸附柱进行吸附，洗涤吸附柱，最后用RNA-free水洗脱，获得茶树RNA。该方法是将现有技术的CTAB法与RNA提取试剂盒结合，在现有茶树RNA提取方法上做了进一步优化，与现有技术相比，该方法提取茶树RNA的时间短，获得的茶树RNA的提取率和纯度高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 茶树 rna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种茶树RNA提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取茶树组织，加入茶树组织0.5～1.5倍重量的不溶性聚乙烯吡咯烷酮PVPP，液氮中研磨成粉末；（2）将步骤（1）的粉末中加入提取液，每1g茶树组织加入4.5mL的提取液，混匀，每1g茶树组织中再加入250μL的β‑巯基乙醇，水浴，得到粗样品；（3）将步骤（2）的粗样品在4℃下离心，取上清转移至RNA提取试剂盒的过滤柱中，离心，获得上清液；（4）将步骤（3）的上清液中加入0.5倍上清液体积的无水乙醇，混匀，获得粗提液；（5）将步骤（4）的粗提液转移至RNA提取试剂盒的吸附柱中进行吸附，然后用RNA提取试剂盒中的去蛋白液和漂洗液洗涤吸附柱，最后用不含核酸酶的RNA‑free水洗脱吸附柱上的RNA，获得茶树RNA。
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