[发明专利]一种基于磁分离的HBsAg核酸适体筛选方法无效
| 申请号： | 201310656889.4 | 申请日： | 2013-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN103667483A | 公开（公告）日： | 2014-03-26 |
| 发明（设计）人： | 何农跃;习志江 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京瑞弘专利商标事务所(普通合伙) 32249 | 代理人： | 冯慧 |
| 地址： | 210096 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于磁分离的HBsAg核酸适体筛选方法，包括如下步骤：Fe3O4磁性纳米颗粒的制备及羧基化修饰；羧基化磁性纳米颗粒的活化并与HBsAg偶联；通过SELEX技术筛选特异识别HBsAg的核酸适体；筛选产物的克隆测序；核酸适体的二级结构分析预测。本发明将筛选靶分子HBsAg固定在表面羧基修饰的Fe3O4磁性纳米颗粒表面，固定量大，同时利用其磁性，便于快速磁分离，可节省筛选时间。所筛选出的核酸适体能特异识别HBsAg且具有高亲和力，在HBsAg的检测诊断领域具有广阔的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 分离 hbsag 核酸 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种基于磁分离的HBsAg核酸适体筛选方法，其特征在于，以Fe3O4磁性纳米颗粒为固相载体进行筛选，包括如下步骤：步骤一、制备Fe3O4磁性纳米颗粒，在所述Fe3O4磁性纳米颗粒表面包覆一层硅壳，得到Fe3O4@SiO2磁性纳米颗粒，再对Fe3O4@SiO2磁性纳米颗粒表面羧基化修饰，得到羧基化Fe3O4@SiO2磁性纳米颗粒；步骤二、对步骤一制备的羧基化Fe3O4@SiO2磁性纳米颗粒进行羧基活化，之后将活化的羧基化Fe3O4@SiO2磁性纳米颗粒与HBsAg偶联，得到偶联HBsAg的磁性纳米颗粒；步骤三、将步骤二制备的偶联HBsAg的磁性纳米颗粒通过SELEX技术筛选特异识别HBsAg的核酸适体；步骤四、将步骤三筛选出的产物进行克隆、测序，并对测序获得的HBsAg核酸适体进行二级结构分析预测。
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