[发明专利]一种靶向HIF低毒性的磁性纳米棒的制备方法

摘要

本发明一种靶向HIF低毒性的磁性纳米棒的制备方法，属于靶向肿瘤细胞治疗磁性纳米。在氨基功能化磁性纳米离子(Fe3O4)表面修饰了溴化4-乙酰基吡啶-2溴丙酸乙酯（ILs)获得带正电荷的磁性纳米离子(Fe3O4-ILs)，接着这种纳米离子通过静电吸附结合HIF的识别序列，该磁性纳米颗粒大小为8nm。细胞毒性实验显示该纳米棒是一种低毒性的纳米材料。磁共振成像实验显示纳米棒能显著区别肿瘤肝细胞与正常肝细胞，我们的发明为构建新型系列核酸诱导的靶向性磁性纳米载体奠定了基础。

主权项

一种靶向HIF低毒性的磁性载体的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：(1)Fe3O4表面修饰制备Fe3O4‑ILs将氨基功能化磁性纳米离子Fe3O4和4‑乙酰基吡啶‑2溴丙酸乙酯按质量比为18:1~18:3混合溶解于二甲基二乙酰胺后转入三口烧瓶中，按与混合液体积比为4:3‑4:10加入乙醇，搅拌6~20 h，转入60℃水浴中回流2‑6 h； 分别加入与反应液体积比为1:1~4:1的丙酮促降，离心分离，得到溶解性好的Fe3O4‑ILs；(2) Fe3O4‑ILs‑DNA1或 Fe3O4‑ILs‑DNA2的制备：1)配制2 mg/mL Fe3O4‑ILs磷酸盐缓冲溶液（10 mM，pH=7.4）中，分散均匀2)按与Fe3O4‑ILs质量比为1:500~4:500，向其中滴加DNA1(或DNA2) (100 uM）PBS 溶液，搅拌均匀；3)将混合溶液置于摇床室温摇动1~4 h， 4)离心分离得黑色纳米颗粒Fe3O4‑ILs‑DNA1或 Fe3O4‑ILs‑DNA2；(3)磁性纳米棒(Fe3O4‑ILs‑DNA)的制备：将制备好的Fe3O4‑IL‑DNA1和Fe3O4‑IL‑DNA2以质量比1:2~2:1，混合均匀，于水浴中加热到1~60oC，稳定1~6 min 缓慢冷却到室温1~3 h，离心分离得磁性纳米棒Fe3O4‑ILs‑DNA，样品 放于冰箱中4℃储存。