[发明专利]一种特利加压素及其杂质的超高效液相色谱检测方法

摘要

本发明提供一种用于分离分析特利加压素及其杂质的超高效液相色谱方法，所述方法包括在超高效液相色谱仪中以缓冲液与有机溶剂不同比例配制的流动相A和流动相B为流动相，梯度洗脱特利加压素及其杂质，从而快速分离分析特利加压素及其杂质。

主权项

一种分离分析特利加压素及其杂质的方法，包括以下步骤：在超高效液相色谱仪中，使用以表面带电杂化(CSH)十八烷基键合硅胶填料的色谱柱，将分别以缓冲液与有机溶剂按不同比例配制的流动相A和流动相B按不同比例混合作为流动相，以流速0.4～0.6mL/min梯度洗脱含特利加压素及杂质的样品，其中，所述流动相A为含有5～30％上述有机溶剂的缓冲液，所述流动相B为含有30～60％上述有机溶剂的缓冲液；其中所述有机溶剂选自下列化合物：甲醇、乙醇、乙腈、异丙醇；所述缓冲液为由磷酸‑三乙胺、加磷酸调节pH至3.0～3.5或加氨水调节pH至6.0～6.5的水溶液，浓度为10mmol/L～50mmol/L；所述梯度洗脱可以根据流动相A、流动相B各自所含的缓冲液、有机溶剂比例不同而改变，其改变的最终依据是0～5分钟时，两相混合后流动相中的有机溶剂比例为5％～20％，在5～20分钟时间段内，逐渐增加有机溶剂比例至30％～40％，保持10分钟，然后在5分钟内将有机溶剂比例降回5％～20％；其中所述杂质的结构如下：1)杂质AGly‑Gly‑c[Cys‑Tyr‑Phe‑Gln‑Asn‑Cys]‑Pro‑Lys‑Gly‑NH2；2)杂质BGly‑Gly‑Gly‑Gly‑c[Cys‑Tyr‑Phe‑Gln‑Asn‑Cys]‑Pro‑Lys‑Gly‑NH2；3)杂质CGly‑Gly‑Gly‑c[Cys‑Tyr‑Phe‑Gln‑Asp‑Cys]‑Pro‑Lys‑Gly‑NH2；4)杂质DGly‑Gly‑Gly‑c[Cys‑Phe‑Gln‑Asn‑Cys]‑Pro‑Lys‑Gly‑NH2；5)杂质EGly‑Gly‑Gly‑c[Cys‑Tyr‑Phe‑Gln‑Asn‑Cys]‑Pro‑Lys‑Gly‑Gly‑NH2；6)杂质FGly‑Gly‑Gly‑c[Cys‑Tyr‑Phe‑Gln‑Asn‑Cys]‑D‑Pro‑Lys‑Gly‑NH2。