[发明专利]一种溶栓豆豉的制备方法

摘要

本发明提供了一种溶栓豆豉的制备方法，包括菌种活化，毛霉种子液的制备，纳豆菌种子液的制备，黄豆的处理，接种，培养，后熟等步骤。本发明以毛霉和纳豆菌产蛋白酶以及纳豆菌产纤溶酶作为评价指标的情况，接种纳豆菌后毛霉生长良好，对蛋白酶含量影响不大，获得的豆豉中纳豆激酶活力达到823.51U/g，蛋白酶活力达到1983.91U/g。本发明寻找到豆豉发酵的最佳条件，在不影响豆豉风味的同时，大大缩短了传统豆豉发酵工艺所需的时间。同时在操作过程中，条件控制方便，有利于生产化操作；本发明在不额外增加任何设备的情况下，仅利用豆豉的原始生产线就能完成纳豆菌和毛霉的对黄豆的共发酵，大大的节省了生产成本。

主权项

一种溶栓豆豉的制备方法，其特征在于，其中所使用纳豆菌HT8保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号CGMCC 7168，毛霉从忠县忠州腐乳毛坯中分离获得，包括如下步骤：步骤一、菌种活化：将斜面保藏毛霉菌种于无菌操作下接种到PDA斜面培养基，于恒温培养箱18‑20℃培养72h，于冰箱中保存备用；吸取100uL纳豆菌HT8到10mL LB培养基，37℃，160r／min培养12h，于冰箱保存备用；步骤二、毛霉种子液的制备：将PDA斜面培养基活化的毛霉菌种加入适量的无菌生理盐水，用移液器吸取适量菌液，接种于麸皮培养基，20℃下培养96h，至三角瓶内鼓皮长满菌丝和灰色孢子后取出备用，在培养好的种曲培养瓶中加入500mL灭菌生理盐水充分摇匀，双层纱布过滤，滤渣再加500mL灭菌生理盐水洗涤一次过滤，两次滤液混合制成孢子悬液，将此孢子悬浮液置于4℃冰箱中，作为菌种保存；步骤三、纳豆菌种子液的制备：取200uL的活化纳豆菌HT8菌种到20mL液体种子培养基，37℃，160r／min培养18h；步骤四、黄豆的处理：选取颗粒饱满，大小均匀的黄豆，称量洗净，与水以1：3的比例于30℃下浸泡3h，沥干，再称取一定量于小烧杯中，在高温高压灭菌锅下，121℃蒸煮30min，冷却，待用；步骤五、接种：将HT8纳豆菌和毛霉按1：10的比例接种，其接种总量为黄豆总质量的4％，接种时可用移液枪进行操作；步骤六、培养：在25℃的温度下培养，在22h时拌菌一次，待培养到48h，即得到豆豉前发酵产物；步骤七、后熟：发酵成熟的豆豉加入一定比例的配料，拌匀，装罐，在4℃条件下，进行后熟处理48h，制得溶栓豆豉。