[发明专利]基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法在审
申请号: | 201310686754.2 | 申请日: | 2013-12-12 |
公开(公告)号: | CN104711227A | 公开(公告)日: | 2015-06-17 |
发明(设计)人: | 魏彦杰;张慧玲;彭丰斌;孟金涛;冯圣中 | 申请(专利权)人: | 深圳先进技术研究院 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;C12N5/077 |
代理公司: | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 | 代理人: | 沈祖锋;郝明琴 |
地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法,属于生物信息学技术领域。该方法将乳腺癌细胞和稳定表达Notch-1配体的间质细胞分别在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养后用PBS缓冲液清洗并收集稳定表达Notch-1配体的间质细胞;在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养间质细胞,按1:1-2:1将稳定表达Notch-1配体的间质细胞加入到乳腺癌细胞中培养而实现激活乳腺癌细胞中Notch-1信号通路。本发明模拟在体内环境中癌细胞中Notch-1与间质细胞表达的Jagged-1相互作用来激活Notch-1信号通路,克服了传统方法中过表达的标准量难以确定、转染的效率难以确定、部分细胞没有被转染的缺陷,避免了过表达方法中过表达无法全面有效的激活Notch-1信号通路、所得生物学结果不客观的情况。 | ||
搜索关键词: | 基于 体外 培养 激活 notch 信号 通路 方法 | ||
【主权项】:
一种基于体外共培养激活Notch‑1信号通路的方法,其特征在于包括如下步骤:(1)将乳腺癌细胞和稳定表达Notch‑1配体的间质细胞分别在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养;(2)待步骤(1)中的两种细胞分别生长到80%的密度,用PBS缓冲液清洗并收集稳定表达Notch‑1配体的间质细胞;(3)在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养间质细胞,按1:1‑2:1将稳定表达Notch‑1配体的间质细胞加入到乳腺癌细胞中;共同培养0.5~48h,实现激活乳腺癌细胞中Notch‑1信号通路。
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