[发明专利]一种分泌表达人Ⅲ型胶原α链蛋白的毕赤酵母工程菌及其构建方法与应用无效

专利信息
申请号: 201310701942.8 申请日: 2013-12-19
公开(公告)号: CN103725623A 公开(公告)日: 2014-04-16
发明(设计)人: 范代娣;马晓轩;张凤龙;李林波;王俊 申请(专利权)人: 西安巨子生物基因技术股份有限公司
主分类号: C12N1/19 分类号: C12N1/19;C12N15/81;C12P21/02;C12R1/84
代理公司: 西安新思维专利商标事务所有限公司 61114 代理人: 李罡
地址: 710077 陕西省西安市*** 国省代码: 陕西;61
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摘要: 发明涉及一种分泌表达人Ⅲ型胶原α链蛋白的毕赤酵母工程菌及其构建方法与应用。Ⅲ型胶原蛋白可应用于生物医用材料,但未实现大规模产业化生产。本发明从人胎盘组织提取RNA,反转录建立cDNA文库,再用PCR的方法扩增出Ⅲ型胶原α链的成熟肽链基因,再将基因与毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K连接,构建质粒pPIC9K-CO3A1;将构建好的质粒pPIC9K-CO3A1线性化后导入毕赤酵母SMD1168中,经过抗性筛选,获得一株高拷贝的毕赤酵母工程菌SMD1168-CO3A1。本发明的工程菌能在胞外高效安全地分泌人Ⅲ型胶原α链蛋白,并具有较高的生物活性,该蛋白可与其他无机材料混合,作为生物可降解生物医用材料,用于组织缺损和修复等。
搜索关键词: 一种 分泌 表达 胶原 蛋白 酵母 工程 及其 构建 方法 应用
【主权项】:
一种分泌表达人Ⅲ型胶原α链蛋白的毕赤酵母工程菌,其特征在于:所述的工程菌于2013年8月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7982。
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