[发明专利]茶叶中草甘膦和草铵膦农药残留量的柱前衍生-UPLC-ESI+-MS/MS检测方法

摘要

本发明茶叶中草甘膦和草铵膦农药残留量的柱前衍生‑UPLC‑ESI+‑MS/MS检测方法，是以硼酸钠作缓冲盐，草甘膦、草铵膦与FMOC‑Cl衍生，再经UPLC色谱洗脱分离得到较为纯净的衍生目标产物，然后采用串联质谱探测响应信号。本发明消除了两农残衍生之间的竞争，有效减弱了基质效应给检测带来的影响，缩短了衍生时间。实验验证，本发明茶叶中草甘膦、草铵膦农药（除草剂）残留量的检测方法具有高效、快速、准确、灵敏度好等特点，适用于晒青毛茶、发酵茶、代用茶（NY/T2140‑2012中华人民共和国农业行业标准绿色食品代用茶）、成品茶(砖茶、沱茶、瓜茶、饼茶、散茶、袋泡茶等)茶样中草甘膦、草铵膦农药残留量的检测。

主权项

茶叶中草甘膦和草铵膦农药残留量的柱前衍生‑UPLC‑ESI+‑MS/MS检测方法，茶叶按GB/T8303制得茶样，其特征在于，包括以下步骤：a)茶样用超纯水和二氯甲烷超声提取或回旋振荡，取上清液；b)上清液经C18反相硅胶键合固相萃取柱，即C18小柱净化得到净化液；c)用FMOC‑Cl丙酮衍生液、硼酸钠缓冲盐溶液衍生净化液制得衍生样品，即待测液；d)将待测液进行UPLC‑ESI+‑MS/MS扫描，扫描结果用草甘膦、草铵膦各自标准校正曲线进行校正，分别得出待测液中草甘膦、草铵膦残留量的质量体积浓度c，μg/mL；e)用下述算式分别计算出茶叶中草甘膦、草铵膦残留量：x=c×v×dm]]>式中：x—为茶叶中草甘膦或草铵膦残留量，mg/kg；c—待测衍生液中草甘膦或草铵膦的质量体积浓度，μg/mL；v—前述步骤a)中超纯水的体积，mL；d—为常数3，衍生时提取净化液的稀释倍数；m—称取待测茶样的质量，g；步骤d)所述UPLC‑ESI+‑MS/MS扫描时确定的参数为：①流动相：流动相A为0.1％甲酸‑乙酸铵‑水，流动相B为纯乙腈、纯甲醇、0.1％甲酸乙腈和50％甲醇乙腈中一种；②超高效液相色谱UPLC参数确定：草甘膦和草铵膦检测的液相梯度洗脱程序为：5％流动相A保持0.5min，1.5min内流动相A由5％变为95％，95％流动相A保持1.5min，0.5min内流动相A由95％变为5％；流速0.3mL/min，C18柱，规格1.7μm，2.1×50mm，样品室温度15℃，色谱柱温度40℃，进样量1‑6μL；③质谱调谐参数的确定：电喷雾离子源ESI，确定用正离子模式ESI+，多反应监测MRM，毛细管电压2.5kv，雾化气和脱溶剂气均为氮气，碰撞气为氩气，脱溶剂气温度400℃，脱溶剂气流速为800L/Hr，锥孔气流速为100L/Hr，离子源温度为150℃；④质谱参数的确定：确定草甘膦衍生物的特征离子对392/88的锥孔电压25v，碰撞电压20v，草甘膦衍生物的特征离子对392/214的锥孔电压25v，碰撞电压10v；草铵膦衍生物的特征离子对404/136的锥孔电压25v，碰撞电压25v，草铵膦衍生物的特征离子对404/208的锥孔电压25v，碰撞电压10v。