[发明专利]一种分离制备抗肿瘤成分灵芝酸C1和灵芝酸F的方法

摘要

一种分离制备抗肿瘤成分灵芝酸C1和灵芝酸F的方法，包括：（1）采用大孔树脂对灵芝醇提物初步富集纯化，将灵芝醇提物分成纯度30%~60%灵芝酸部位；（2）将分离得到的灵芝酸部位经高速逆流色谱再次分离，得到纯度较高的灵芝酸。溶剂体系由石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水组成，体积比为5:3-7:1-6:4-9；溶剂上相为固定相，下相为流动相，样品用下相溶液溶解并进样；固定相流速10~20mL/min，流动相流速1.5~3mL/min，主机转速600~1000转/分钟，采用自动部分收集器收集分离物，每4~10mL收集为一个馏分；（3）高效液相色谱法分析检测各试管收集液成分，按不同成分收集、浓缩、干燥，分离得到纯度高达95%的灵芝酸C1和灵芝酸F。本方法具有高效、快速、分离量大、回收率高、节约溶剂等特点。

主权项

一种分离制备抗肿瘤成分灵芝酸C1和灵芝酸F的方法，其特征在于采用大孔树脂层析和高速逆流色谱二种技术联用的分离纯化灵芝酸的方法，它包括：1.1大孔树脂分离纯化灵芝酸：选择大孔树脂HZ‑801B、HZ‑806、HZ‑816、HZ‑818、HZ‑835或AB‑8中的一种，装柱，以30%~60%乙醇溶解灵芝醇提物并上样，按水、30%~90%乙醇，依次进行梯度洗脱柱子，其中乙醇的浓度按10%~20%递增，将灵芝酸慢慢洗脱下来，每1/15 ~1/3柱体积收集为一个馏分，每个馏分由高效液相色谱仪分析检测其成分，并合并其中主要含有灵芝酸C1和灵芝酸F的馏分，浓缩得到以灵芝酸C1和灵芝酸F为主的混合物；1.2高速逆流色谱法分离灵芝酸：溶剂体系由石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水组成，其体积用量比为5 : 3‑7 : 1‑6 : 4‑9；按上述溶剂体系配制溶液，并置于分液漏斗中充分震摇后静置分层，取上相为固定相，下相为流动相，超声脱气15‑30min，冷却至室温后备用；先将固定相以10~20mL/min流速泵入主机，待主机充满固定相后，以1.5~3mL/min泵入流动相，同时开启主机转速，主机转速600~1000转/分钟，待体系平衡后，再以流动相溶解步骤1.1制得的灵芝酸C1和灵芝酸F混合物并进样，流出液由自动部分收集器，每4~10mL收集为一个馏分，每个馏分的成分由高效液相色谱仪分析检测。