[发明专利]能源柳组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种能源柳组织培养快速繁殖方法。它包括以下步骤：A：外植体的选取；B：外植体消毒：外植体茎段去叶，然后将冲洗干净的枝条置于超净工作台内，先用乙醇溶液中清洗，用无菌水冲洗，然后用氯化汞消毒，无菌水冲洗；C：初代培养；D：增殖培养：将生长良好的初代培养茎段接入增殖培养基；E：生根培养；F：炼苗和移栽：将生根培养基的瓶盖打开，在室温下培养，然后取出幼苗，移栽到蛭石草炭土基质上。采用上述的方法后，由于本发明中选用了合理科学的培养方法及步骤，同时控制了合理的参数，由此培养出的能源柳组织质量非常好，能源柳声场快速，由此为实现能源柳规模化、工厂化育苗，加快优良种质的推广应用提供了重要的保证。

主权项

一种能源柳组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：A：外植体的选取：外植体取自扦插培养的新生枝条；B、外植体消毒：外植体茎段去叶，然后将冲洗干净的枝条置于超净工作台内，先用75%的乙醇溶液中清洗,用无菌水冲洗1次，然后用0.1%氯化汞消毒，无菌水冲洗；C、初代培养：经过消毒的外植体切成2‑3cm的小段,每一个小茎段上至少有一个芽，将其接种在制备好的启动培养基上，启动培养基为B5+ 0.8 mg/L 6‑BA+ 0.2 mg/L NAA，培养室温度20‑25 ℃,光照强度2000‑3000Lx,光照12‑14h/d，培养20‑25d；D、增殖培养：将生长良好的初代培养茎段接入增殖培养基，增殖培养基为B5+0.6mg/L 6‑BA+0.1mg/L NAA，培养条件如步骤3，培养30‑40d；E、生根培养:将增殖培养培养基中健壮的幼芽，切成2‑3cm的小段，接入生根培养基中生根培养，前10d弱光培养，然后光照条件如步骤C培养，共培养35‑40d；F、炼苗和移栽：当生根培养的小苗长有3条以上不定根时，将生根培养基的瓶盖打开，在室温下培养，然后取出幼苗，移栽到蛭石草炭土基质上，保持温度20‑25℃，湿度80‑90%，并用遮阳网遮阴。