[发明专利]一种矿区环境样品微生物基因组DNA与总RNA同时提取的方法无效
| 申请号： | 201310732553.1 | 申请日： | 2013-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN103642798A | 公开（公告）日： | 2014-03-19 |
| 发明（设计）人： | 谢建平;刘新星;云慧;邱冠周 | 申请（专利权）人： | 中南大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 410083*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种矿区环境样品微生物基因组DNA与总RNA同时提取的方法，步骤S1：环境样品的预处理，通过离心的方法收集液体样品中的微生物或通过过滤的方法剔除固体样品中的杂质；步骤S2：细胞的破碎，将步骤S1中预处理好的样品与石英砂混合后加入液氮研磨三次，再加入pH值为7.0的PIPES抽提缓冲液和十二烷基磺酸钠溶液在65℃下裂解细胞1小时；步骤S3：核酸纯化与沉淀，裂解细胞完毕后通过离心的方法收集上清液，并向上清液中加入萃取剂离心萃取蛋白与脂类，待萃取后，上清液用异丙醇沉淀并离心获取总核酸，总核酸经过分离即可得到宏基因组DNA与总RNA。本发明具有低成本、能够同时从矿区环境样品中提取高纯度、完整性好的宏基因组DNA与总RNA的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 矿区 环境 样品 微生物 基因组 dna rna 同时 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种矿区环境样品微生物基因组DNA与总RNA同时提取的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤，步骤S1.环境样品的预处理，通过离心的方法收集液体样品中的微生物或通过过滤的方法剔除固体样品中的杂质；步骤S2.细胞的破碎，将步骤S1中预处理好的样品与灭菌的石英砂混合后加入液氮研磨三次，再加入pH值为7.0的PIPES抽提缓冲液和十二烷基磺酸钠溶液在65℃下裂解细胞1小时；步骤S3.核酸纯化与沉淀，裂解细胞完毕后通过离心的方法收集上清液，并向上清液中加入萃取剂离心萃取蛋白与脂类，待萃取后，上清液用冰冻的异丙醇或乙醇沉淀并离心获取总核酸，总核酸经过分离即可得到宏基因组DNA与总RNA。
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