[发明专利]采用UPLC-MS检测保健品中孔雀石绿残留的方法

摘要

本发明公开了一种采用UPLC-MS检测保健品中孔雀石绿残留的方法，包括如下步骤：（1）提取:精密称取5.00g保健品样品，于第一离心管中，加入氘代孔雀石绿-D5乙腈溶液为内标标准溶液，加乙腈，提取，离心，上清液移至比色管中；另取第二离心管加入乙腈，洗刀头，洗涤液移入第一离心管中，捣碎沉淀，超声波振荡，离心，上清液合并至比色管中，用乙腈定容；（2）净化:移取步骤（1）获得的溶液加至已活化的中性氧化铝柱上，收集全部流出液，蒸发，残液用乙腈定容，超声振荡,加入乙酸铵水溶液，超声振荡，滤膜过滤；（3）测定：滤液进行UPLC-MS测定，本发明的方法快速、准确，降低有机试剂消耗，重现性好。

主权项

采用UPLC‑MS检测保健品中孔雀石绿残留的方法，其特征是包括如下步骤：（1）提取:精密称取5.00g保健品样品于50mL第一离心管中，加入200μL浓度为1ug/ml的氘代孔雀石绿‑D5乙腈溶液为内标标准溶液，加入9‑11mL乙腈，超声波振荡提取1.5‑3min，7500‑8500r/min匀浆提取20‑40s，3500‑4500r/min离心4‑6min，上清液转移至25mL比色管中；另取50mL第二离心管加入9‑11mL乙腈，洗涤匀浆刀头10s，洗涤液移入第一离心管中，用玻棒捣碎第一离心管中的沉淀，漩涡混匀器上振荡20‑40s，超声波振荡4‑6min，3500‑4500r/min离心4‑6min，上清液合并至25mL比色管中，用乙腈定容至25mL，摇匀备用；（2）净化:移取5.00mL步骤（1）获得的溶液加至已活化的中性氧化铝柱上，用浓缩瓶接收流出液，用4mL乙腈洗涤中性氧化铝柱，收集全部流出液，40‑50℃旋转蒸发至小于1mL的残液，残液用乙腈定容至1mL，超声振荡4‑6min,加入1.0mL5mmol/L乙酸铵水溶液，超声振荡1min，经0.2μm滤膜过滤；（3）测定：取步骤（2）获得的滤液进行UPLC‑MS测定，分别吸取1μL浓度为1ug/ml的孔雀石绿乙腈标准溶液、1μL浓度为1ug/ml的氘代孔雀石绿‑D5的乙腈标准溶液，在以下色谱条件下进行分析，获得色谱图；UPLC条件为：a）色谱柱：AcquityBEHC18柱，50mm×2.1mm，粒度1.8μm；b）流动相：A‑乙腈；B‑5mmol/L乙酸铵水溶液；时间流速（ml/mim）A%B%起始0.350500.50.350503.50.385153.60.39824.50.39914.60.3505050.35050c）柱温：35℃；d）进样量：1μL。