[发明专利]一种快速构建高表达稳定性细胞株的方法有效
| 申请号： | 201310743883.0 | 申请日： | 2013-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN103695375A | 公开（公告）日： | 2014-04-02 |
| 发明（设计）人： | 陈倩怡;王笑非 | 申请（专利权）人： | 佛山安普泽生物医药有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/63 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 李国钊;刘婉 |
| 地址： | 528231 广东省佛山市南海区狮山镇虹*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种快速构建高表达稳定性细胞株的方法，步骤如下：（1）构建Gal4-VP16融合蛋白的表达载体质粒；（2）构建UAS-目标基因蛋白的表达载体质粒；（3）将上述Gal4-VP16融合蛋白的表达载体质粒和UAS-目标基因蛋白的表达载体质粒转导进入宿主细胞；（4）选择筛选目标基因的稳定表达细胞株；（5）扩增；（6）获得高表达稳定细胞株。本发明的方法能够有效快速构建高表达的、稳定的细胞株。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 构建 表达 稳定性 细胞株 方法 | ||
【主权项】：
一种快速构建高表达稳定性细胞株的方法，步骤如下：（1）构建Gal4‑VP16融合蛋白的表达载体质粒，在Gal4及VP16之间加入大T抗原核定位信号；（2）构建UAS‑目标基因蛋白的表达载体质粒，在该UAS‑目标基因蛋白的表达载体质粒的启动子前构建5个UAS cis‑调节位点；（3）采用IRES连接目标基因及DHFR基因，将上述Gal4‑VP16融合蛋白的表达载体质粒及UAS‑启动子‑目标基因的表达载体质粒同时转导入宿主细胞中；（4）选择筛选目标基因的稳定表达细胞株；（5）扩增；（6）获得高表达稳定细胞株。
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