[发明专利]在昆虫细胞sf9中表达hABCG2的方法在审
| 申请号： | 201310751320.6 | 申请日： | 2013-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN104745632A | 公开（公告）日： | 2015-07-01 |
| 发明（设计）人： | 谢伟胜;张科之 | 申请（专利权）人： | 苏州杰诺曼博生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/866 | 分类号： | C12N15/866;C12N15/12;C07K14/47 |
| 代理公司： | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人： | 陆明耀;姚姣阳 |
| 地址： | 215123 江苏省苏州市苏州工*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种在昆虫细胞sf9中表达人hABCG2的方法，是将两端分别包含BamHI和HindIII酶切位点的人ABCG2基因克隆入pFastBac1载体的BamHI和HindIII位点，将得到的重组质粒pFastBac1-hABCG2转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞，获得插入hABCG2基因的重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-hABCG2，脂质体介导上述重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-hABCG2转染sf9昆虫细胞，获得表达hABCG2的重组病毒，进一步培养所述重组病毒，表达hABCG2蛋白。本发明方法为hABCG2蛋白的大量获得提供一条新途径，为hABCG2蛋白的应用开发打下工作基础。 | ||
| 搜索关键词： | 昆虫 细胞 sf9 表达 habcg2 方法 | ||
【主权项】：
一种在昆虫细胞sf9中表达人hABCG2的方法，其特征在于包括如下步骤:步骤一，人工合成两端分别包含BamHI和HindIII酶切位点的hABCG2基因；步骤二，将hABCG2基因克隆入pFastBac1载体的BamHI/HindIII位点，得到重组质粒pFastBac1‑hABCG2；步骤三，将重组质粒pFastBac1‑hABCG2转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞，与其中的杆状病毒穿梭载体Bacmid重组，获得插入hABCG2基因的重组杆状病毒穿梭载体Bacmid‑hABCG2；步骤四，脂质体介导重组杆状病毒穿梭载体Bacmid‑hABCG2转染sf9昆虫细胞，获高滴度的hABCG2的重组病毒；步骤五，hABCG2的重组病毒感染SF9昆虫细胞，大量表达hABCG2蛋白。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于苏州杰诺曼博生物科技有限公司;，未经苏州杰诺曼博生物科技有限公司;许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201310751320.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
