[发明专利]高密度发酵生产普鲁兰多糖的方法

摘要

本发明公布了一种高密度发酵生产普鲁兰多糖的方法，属于微生物发酵领域。为了解决传统优化调控方法中的不足，进一步增加普鲁兰多糖产量，提高普鲁兰多糖发酵过程中的效率，降低发酵过程中色素的产生，本发明通过两阶段调控pH和溶氧，从而实现高密度发酵，将普鲁兰多糖产量提高50%以上，而且在一定程度上降低了色素的产生，为后续提取减少了麻烦，进一步降低了普鲁兰多糖的成本。

主权项

一种高密度发酵生产普鲁兰多糖的方法，具体步骤如下：（1）将菌株接于种子培养基进行摇瓶活化，转速为150‑250rpm，温度为28℃，培养时间为30‑35小时;（2）活化后的种子培养液以2‑5%（v/v）的量接于新的种子摇瓶中进行扩大培养，转速为150‑250rpm，温度为28℃，培养时间为16‑20小时;（3）将步骤(2)所得种子液以2‑5%（v/v）的量接于5L发酵罐中进行发酵培养，根据菌体生长情况即OD₆₂₀值对pH和溶氧进行调控：当菌体OD₆₂₀＜0.7（种子干重小于12g/L）时，溶氧降至60%左右时，将溶氧与搅拌串联，使溶氧维持在50%‑60%之间，同时利用3mol/L的盐酸和3mol/L的氢氧化钠调控pH使其稳定在2.8‑3.2之间使菌体大量产生；当菌体OD₆₂₀≥0.7（种子干重不小于12g/L）时，将溶氧设定在25%‑30%之间，同时利用3mol/L的盐酸和3mol/L的氢氧化钠调控pH使其稳定在4.8‑5.2之间使菌体大量合成普鲁兰多糖；温度28℃，发酵时间72‑96小时。