[发明专利]一种培养游动放线菌获取雷帕霉素发酵液的方法

摘要

本发明公开了一种利用游动放线菌获取雷帕霉素发酵液的方法，属于发酵工程技术领域。步骤如下：在斜面培养基上培养游动放线菌（Actinoplanes）CGMCC No.8430，将培养好的斜面菌种接种到摇瓶种子培养基，再将培养好的种子液接种到种子罐中，之后接种到发酵培养基中发酵培养，得雷帕霉素发酵液。本发明通过培养基的优化及培养条件的控制，能够使游动放线菌产生较高浓度的雷帕霉素，在30L发酵罐的发酵实验中，雷帕霉素的产量可达到750mg/L左右，在200L发酵罐的发酵实验中，雷帕霉素的产量可达到840mg/L左右，使雷帕霉素更容易满足工业化生产的需要，且高浓度更有利于后续的提取工作。

主权项

一种培养游动放线菌生产雷帕霉素发酵液的方法，其特征在于，所述游动放线菌为保藏编号CGMCC NO.8430的菌株，具体方法如下：(1)菌种活化将甘油保存的游动放线菌(Actinoplanes)转接至保藏分离培养基，于恒温培养箱中，28℃培养7‑15d，至斜面由橙色变为黄褐色；(2)摇瓶种子培养选择生长良好的活化斜面，取1cm²大小的菌种转接于新鲜种子培养基中，于28℃，180‑250r/min的立式摇床上，培养40‑55h；(3)种子罐种子培养：将摇瓶种子培养液以6％‑15％接种量接种于种子罐培养基中，28℃，培养38‑52h，得种子液；(4)发酵培养将种子液以8‑15％的接种量接种于装有发酵培养基的发酵罐中，通入无菌空气并开启搅拌，于28℃，培养30‑48h后，一次性补加赖氨酸；继续发酵110h‑160h，得到雷帕霉素发酵液；所述发酵培养基组成为:玉米淀粉1‑4％，葡萄糖0.5‑3％，黄豆饼粉0.5‑4％，蛋白胨0.1‑2％，磷酸氢二钾0.1‑3％，磷酸二氢钾0.1‑3％，硫酸镁0.05‑0.4％，氯化钠0.01‑2％，甘油1‑4％，碳酸钙0.1‑0.5％，泡敌0.05‑0.4％，pH6.9‑7.4，自来水配制。