[发明专利]用于RNA定向的靶DNA修饰和用于RNA定向的转录调节的方法和组合物有效

专利信息
申请号: 201380038920.6 申请日: 2013-03-15
公开(公告)号: CN104854241B 公开(公告)日: 2017-07-14
发明(设计)人: J·A·多德纳;M·金内克;K·凯林斯基;埃玛纽埃尔·沙尔庞捷;J·H·多德纳凯特;W·利姆;亓磊 申请(专利权)人: 埃玛纽埃尔·沙尔庞捷;加利福尼亚大学董事会;维也纳大学
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12N15/63;C07K19/00;C12N5/10
代理公司: 北京北翔知识产权代理有限公司11285 代理人: 张广育,姜建成
地址: 德国不*** 国省代码: 暂无信息
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摘要: 本公开提供包含靶向序列的靶向DNA的RNA,以及修饰多肽,提供靶DNA和/或与所述靶DNA相关的多肽的位点特异性修饰。本公开进一步提供位点特异性修饰多肽。本公开进一步提供位点特异性修饰靶DNA和/或与所述靶DNA相关的多肽的方法。本公开提供调节靶细胞中的靶核酸转录的方法,所述方法总体上涉及使所述靶核酸与酶失活的Cas9多肽和靶向DNA的RNA接触。还提供执行所述方法的试剂盒和组合物。本公开提供产生Cas9的遗传修饰的细胞;和Cas9转基因非人多细胞生物。
搜索关键词: 用于 rna 定向 dna 修饰 转录 调节 方法 组合
【主权项】:
一种修饰靶DNA的方法,所述方法包括使所述靶DNA与复合物接触,所述复合物包含:(a) Cas9多肽,以及(b) 单分子靶向DNA的RNA,其包含:(i) DNA靶向区段,其包含与所述靶DNA中的序列互补的核苷酸序列;和(ii) 蛋白质结合区段,其与所述Cas9多肽相互作用,其中所述蛋白质结合区段包含杂交以形成双链RNA(dsRNA)双链体的两个互补核苷酸段,其中所述dsRNA双链体包含tracrRNA和CRISPR RNA(crRNA)的互补核苷酸,其中所述两个互补核苷酸段是通过插入核苷酸共价连接,其中所述接触为体外的或在离体细胞内;以及其中所述修饰为裂解所述靶DNA。
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