[发明专利]用于提高表达的细菌提取物中选定蛋白的蛋白水解失活有效
| 申请号： | 201380063443.9 | 申请日： | 2013-10-08 |
| 公开（公告）号： | CN104837863B | 公开（公告）日： | 2018-06-19 |
| 发明（设计）人： | 克里斯托弗·D·萨诺斯;克里斯托弗·J·默里;杨俊豪;希瑟·斯蒂芬森 | 申请（专利权）人： | 苏特罗生物制药公司 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C12N9/50 |
| 代理公司： | 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 11204 | 代理人： | 王达佐;洪欣 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本申请提供能够被蛋白酶OmpT1切割的修饰蛋白。可以在暴露的表面基序中修饰蛋白以并入OmpT1切割位点。还提供了编码修饰蛋白的核酸，表达修饰蛋白的细菌细胞和包含修饰RF1的无细胞合成体系。本申请进一步提供在无细胞合成体系中，通过修饰蛋白与OmpT1接触，降低修饰蛋白的不利活性的方法。还提供在无细胞合成体系中，减少RF1在琥珀密码子竞争的方法，以及在无细胞合成体系中表达蛋白的方法。本发明的修饰蛋白可被用于增加在琥珀密码子并入非天然氨基酸的蛋白的产率。 1 | ||
| 搜索关键词： | 修饰蛋白 无细胞合成 密码子 琥珀 蛋白 编码修饰蛋白 蛋白水解失活 非天然氨基酸 细菌提取物 蛋白酶 表达蛋白 切割位点 细菌细胞 表面基 产率 核酸 申请 修饰 切割 暴露 | ||
【主权项】：
1.功能性释放因子1蛋白(RF1)，其可被外膜蛋白T1(OmpT1)切割，其中可切断的OmpT1肽键位于对应于野生型RF1(SEQ ID NO:1)的氨基酸287‑304的转换环区中，并且其中所述转换环区被修饰为包含三个相邻碱性氨基酸，所述碱性氨基酸在pH7.0下带正电荷。
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