[发明专利]用于分析物定量的中子编码质量标签有效

专利信息
申请号: 201380068114.3 申请日: 2013-10-16
公开(公告)号: CN107250797B 公开(公告)日: 2019-08-06
发明(设计)人: J·J·库恩;A·赫伯特 申请(专利权)人: 威斯康星校友研究基金会
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68
代理公司: 北京北翔知识产权代理有限公司 11285 代理人: 张广育;姜建成
地址: 美国威*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 发明提供质谱方法、组合物和系统,其使得能够实现用于达到了非常高度的多路复用和精确定量的分析物定量的独特平台,特别适合于用于蛋白质组学应用的一系列定量分析。本方法和系统的实施方案将特征为分子量差异非常小的同位素编码试剂与提供高分辨率的质谱法结合起来,以提供在大量样品中的相对或绝对分析物定量。
搜索关键词: 用于 分析 定量 中子 编码 质量 标签
【主权项】:
1.一种用于确定多个样品中分析物的丰度的方法,所述方法包括以下步骤:(a)提供包括至少第一细胞培养物和第二细胞培养物的多个细胞培养物;(b)向每种所述细胞培养物提供不同的同位素标记的氨基酸,其中各同位素标记的氨基酸包含至少两个稳定的重同位素,其在正常氨基酸中被替换为轻同位素,并且其中所述两个重同位素中至少一个选自15N、18O和34S,其中每种所述细胞培养物的所述同位素标记的氨基酸是相同氨基酸的同位素体;(c)培养每种所述细胞培养物的细胞,从而将不同的同位素标记物引入每种细胞培养物产生的蛋白质中;(d)生成每种所述细胞培养物的样品,其中每种样品的特征在于不同的同位素标记的分析物,所述样品至少包括具有第一同位素标记的分析物的所述第一细胞培养物的第一样品和具有第二同位素标记的分析物的所述第二细胞培养物的第二样品,其中每种样品的所述同位素标记的分析物是同位素体;且其中所述第一同位素标记的分析物和所述第二同位素标记的分析物的分子质量差异小于或等于300mDa;(e)利用提供分辨率等于或大于100000的质谱分析技术分析每种样品的所述同位素标记的分析物,从而产生每种样品的所述同位素标记的分析物的独立且可区分的质谱信号;以及(f)比较每种样品的所述同位素标记的分析物的所述质谱信号,从而确定所述多个样品中所述分析物的丰度。
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