[发明专利]卵巢和子宫内膜癌的帕帕尼科拉乌测试

摘要

最近开发的基于液体的帕帕尼科拉乌(Pap)涂片不仅允许进行细胞学评估，而且允许采集用于检测宫颈癌病原体HPV的DNA。本发明测试了这些样本，以检测存在于稀少的肿瘤细胞中的体细胞突变，该肿瘤细胞一旦从子宫内膜癌和卵巢癌中排出，可在宫颈中积累。收集子宫内膜癌和卵巢癌中一组常见突变的基因并用于鉴定所有46个子宫内膜或宫颈癌组织样本中的突变。本发明还能够鉴定来自100％的子宫内膜癌(24个中的24个)和41％的卵巢癌(22个中的9个)中的液体巴氏涂片的DNA中相同的突变。本发明开发了基于序列的方法，以在没有肿瘤基因型现有知识的情况下查询单个液体巴氏涂片中12种基因中的突变。

主权项

1.用于针对指示女性生殖道中恶性肿瘤的存在的突变测试巴氏样本中一组基因的试剂盒，所述试剂盒包括用于唯一标示符指定PCR循环的至少6种引物对，其中每种引物包括至少15nt的与所述一组基因中的一种互补的序列和用于通用扩增的5’通用标签，其中每个引物对中的一个引物包括位于所述5’通用标签和所述至少15nt的与所述一组基因中的一种互补的序列之间的唯一标示符，其中所述唯一标示符包括14个简并N碱基，其中所述组与至少6种不同的基因累积地互补，其中所述组选自CTNNB1、EGFR、PI3KCA、PTEN、TP53、BRAF、KRAS、AKT1、NRAS、PPP2R1A、APC、FBXW7、ARID1A、CDKN2A、MLL2、RNF43和FGFR2，其中所述试剂盒还包括用于第二轮扩增的通用引物，并且所述女性生殖道中恶性肿瘤为子宫内膜癌或卵巢癌。