[发明专利]HCV抗原-抗体组合测定和方法以及用在其中的组合物

摘要

本发明一般地涉及用于同时检测试验样品中的HCV抗原和抗‑HCV抗体的组合免疫测定、试剂和试剂盒。

主权项

1.下列试剂在制备用于通过以下方法组合检测试验样品中的HCV抗原和HCV抗体的试剂盒中的用途：i. 能够结合生物素的固相，其包含与其结合的生物素化的抗‑HCV抗体和第一生物素化的HCV抗原，所述生物素化的抗‑HCV抗体选自单克隆抗体AOT3、C11‑3、C11‑7、C11‑9和C11‑14，所述第一生物素化的HCV抗原由SEQ ID NO: 98、SEQ ID NO: 99，或SEQ ID NO: 101的氨基酸序列组成，其中所述生物素化的抗‑HCV抗体结合所述试验样品中的HCV抗原，并且所述第一生物素化的HCV抗原结合所述试验样品中的抗‑HCV抗体；和ii. 第一可检测地标记的HCV抗原，其用于结合被所述第一生物素化的HCV抗原捕获的抗‑HCV抗体；其中，所述方法包括以下步骤：a) 同时提供上述试剂；b) 在一定条件下温育步骤(a)的试剂，由此：i. 所述生物素化的抗‑HCV抗体结合至所述固相并特异性地结合存在于所述试验样品中的HCV抗原，以产生捕获在所述固相上的生物素化的抗‑HCV抗体‑HCV抗原复合物；ii. 所述第一生物素化的HCV抗原结合至所述固相并特异性地结合存在于所述试验样品中的抗‑HCV抗体，以产生捕获在所述固相上的第一生物素化的HCV抗原‑抗‑HCV抗体复合物；和iii. 所述第一可检测地标记的HCV抗原特异性地结合捕获在所述固相上的所述第一生物素化的HCV抗原‑抗‑HCV抗体复合物的抗‑HCV抗体；c) 将包含捕获的抗‑HCV抗体和捕获的HCV抗原的固相与未反应的试验样品和试剂分离；d) 使分离的固相与可检测地标记的缀合物抗体接触，所述缀合物抗体结合所述抗‑HCV抗体‑HCV抗原复合物的所述HCV抗原；和e) 检测：(i) 从所述可检测标记的缀合物抗体产生的第一信号，其中所述第一信号的存在指示HCV抗原在所述试验样品中的存在；和(ii) 从所述第一可检测地标记的HCV抗原产生的第二信号，其中所述第二信号的存在指示抗‑HCV抗体在所述试验样品中的存在。