[发明专利]一种用于抑制猪瘟病毒复制的Npro207shRNA及其制备方法在审
| 申请号： | 201410001353.3 | 申请日： | 2012-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN103667298A | 公开（公告）日： | 2014-03-26 |
| 发明（设计）人： | 刘湘涛;陈妍;田宏;吴锦艳;尚佑军;尹双辉;王光祥;靳野;张克山;杨顺利;刘永杰 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/867 |
| 代理公司： | 甘肃省知识产权事务中心 62100 | 代理人： | 鲜林 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 一种用于抑制猪瘟病毒复制的Npro207shRNA，所述包含siRNA序列，shRNA慢病毒表达载体构建，复制缺陷型慢病毒的获得、慢病毒感染PK-15细胞（猪肾细胞）以及抑制猪瘟病毒复制效果的验证方法，该序列具有明显抑制猪瘟病毒在敏感细胞上复制的作用。本发明对猪瘟病毒体内外复制进行RNA干扰的探索，构建靶向猪瘟病毒基因组的特定保守基因区段的慢病毒载体介导的稳定整合的RNA干扰技术，有望构建靶向猪瘟病毒的siRNA的转基因动物。为shRNA应用于猪瘟病毒的基因功能研究以及猪瘟的防治积累了必要的实验数据，为动物的抗病育种提供前期准备。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 抑制 猪瘟 病毒 复制 npro207shrna 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种用于抑制猪瘟病毒复制的Npro207shRNA，其特征在于包含siRNA序列、通过构建Npro207shRNA慢病毒表达载体，获得复制缺陷型慢病毒，用所述慢病毒感染PK‑15细胞，筛选表达Npro207shRNA的PK‑15细胞克隆并验证其对CSFV的抑制效果；所述具有抑制效果的Npro207shRNA序列SEQ ID NO:1和 SEQ ID NO:2，即：Npro207: 5’→3’SEQ ID NO:1：T CACCGCCCACTATTAGGCTAGTATACGATATACTAGCCTAATAGTGGGCSEQ ID NO:2：B AAAAGCCCACTATTAGGCTAGTATATTCGATATACTAGCCTAATAGTGGGC。
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