[发明专利]载脂蛋白B抗血清的制备方法有效
| 申请号： | 201410004058.3 | 申请日： | 2014-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN104017075B | 公开（公告）日： | 2020-02-28 |
| 发明（设计）人： | 杨昌国 | 申请（专利权）人： | 杨昌国 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C07K16/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 315000 浙江省宁波市江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种载脂蛋白B抗血清的制备方法，其技术方案要点是：1）将血清通过多阴离子化合物和二价金属离子处理获得低密度脂蛋白；2）将低密度脂蛋白中的杂蛋白除去，使其净含载脂蛋白B；3）将其作为抗原对免疫动物进行免疫，该发明的优势在于1）用多阴离子和二价金属离子制备浓缩的LDL粗品，使后续的超速离心次数和时间大大节省（20倍），为大批量提取ApoB提供了条件，2）合理提高抗原剂量免疫动物，可缩短抗血清的制备时间，只须传统方法的二分之一，而且免疫的效价和成功率亦比传统方法提高。 | ||
| 搜索关键词： | 脂蛋白 血清 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种载脂蛋白B抗血清的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：1）血清的预处理：将用于制备载脂蛋白B的血清通过浓度为6%‑22%的多阴离子化合物和浓度为2‑8mol/L的二价金属离子处理后获得低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白；2）净含载脂蛋白B的低密度脂蛋白的提取：将获得的低密度脂蛋白依次经过生理盐水和0.5‑1.1mol/L的草酸钾处理，离心过后取上层液进行透析获得低密度脂蛋白粗品，对低密度脂蛋白粗品用密度调节试剂进行密度调节，调节完成后进行超速离心，再通过凝胶柱层析获得净含载脂蛋白B的低密度脂蛋白；3）载脂蛋白B抗血清的制备：将载脂蛋白B作为抗原对动物进行免疫反应，制备载脂蛋白B抗血清。
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