[发明专利]用于校准载脂蛋白A1和载脂蛋白B的校准物的制备方法

摘要

本发明公开了一种载脂蛋白A1和载脂蛋白B校准物的制备方法，其技术方案要点是：1）将血清加入多阴离子化合物和二价金属离子进行预处理；2）低密度脂蛋白的提取；3）高密度脂蛋白的提取；4）将蛋白与基质血清混合制备校准物；5）校准物的定值，本发明的优势在于，简化多阴离子化合物和二价金属离子分步沉淀法提取血清中的LDL和HDL组份，并测得其ApoB和ApoA1含量，可按需要的量加到健康人混合血清中,使ApoA1和ApoB达到预期的含量，方法简便，再在上述混合血清中，加稳定剂，防混浊剂，使制备的冻干校准物，复溶后澄清，稳定性好，不存在基质效应，稀释成5个不同浓度，即可在自动分析仪上作ApoA1和ApoB测定的非线性校准。

主权项

一种用于校准载脂蛋白A1和载脂蛋白B的校准物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：1）血清的处理：将血清分成两部分，一部分作为基质血清，另一部分作为用于提取低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的组分，往用于提取低密度脂蛋白和高密度脂蛋白的血清中加入浓度为6%‑20%的多阴离子化合物，离心、沉淀低密度脂蛋白；2）低密度脂蛋白的提取：将沉淀的低密度脂蛋白溶解，用草酸钾沉淀过剩的多阴离子化合物，离心后取上层清液，再次用生理盐水透析；3）高密度脂蛋白的提取：取沉淀低密度脂蛋白之后的上层液，追加浓度为6%‑20%的多阴离子化合物和浓度为2‑8mol/L的二价金属离子，沉淀其中的极低密度脂蛋白，离心，取上层液再加入相同浓度的多阴离子化合物和二价金属离子，离心，取沉淀物加入草酸钾溶液沉淀多余的多阴离子化合物和二价金属离子，离心，取上层清液用生理盐水透析；4）基质血清的处理：在基质血清中加入高密度脂蛋白和低密度脂蛋白，调节载脂蛋白A1和载脂蛋白B的浓度，再加入柠檬酸三钠、丙氨酸和海藻糖混匀溶解。