[发明专利]利用RORγt为标记物分选LTi细胞的方法有效
| 申请号： | 201410006630.X | 申请日： | 2014-01-07 |
| 公开（公告）号： | CN103698261A | 公开（公告）日： | 2014-04-02 |
| 发明（设计）人： | 田志强;倪兵;吴玉章;田易;杨玓;颜秋萍;倪东京;张轶;张梦洁;杨爽;朱小霜 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学 |
| 主分类号： | G01N15/14 | 分类号： | G01N15/14 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人： | 赵荣之 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明公开了利用RORγt为标记物分选LTi细胞的方法，包括如下步骤：制备淋巴细胞悬液或外周血单个核细胞，然后加入同种类荧光标记的CD3、CD19、CD11c、Gr-1和NKp46抗体，孵育，PBS洗涤，得洗涤细胞；将洗涤细胞固定、清洗、离心，然后进行打孔，经染色后加入与上述不同荧光标记的RORγt抗体，避光反应后清洗细胞，离心，最后上流式细胞仪进行分选CD3、CD19、CD11c、Gr-1CD4、NKp46阴性、RORγt阳性的细胞，得LTi细胞，利用此方法分选LTi细胞，其方法简单，分选获得的LTi细胞纯度高，达95.7%。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 ror 标记 分选 lti 细胞 方法 | ||
【主权项】：
利用RORγt为标记物分选LTi细胞的方法，其特征在于，具体步骤如下：A.制备淋巴细胞悬液或外周血单个核细胞；B.将步骤A所得淋巴细胞悬液或外周血单个核细胞加入同种荧光标记的CD3、CD19、CD11c、Gr‑1和NKp46抗体，孵育，PBS洗涤，得洗涤细胞；C.将步骤B所得洗涤细胞固定、清洗、离心，然后进行打孔，经染色后加入另一种荧光标记的RORγt抗体，避光反应后清洗细胞，离心，得RORγt抗体标记的细胞；D.将步骤C所得RORγt抗体标记的细胞重悬后，上流式细胞仪进行分选CD3、CD19、CD11c、Gr‑1CD、NKp46阴性，RORγt阳性的细胞，得LTi细胞。
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