[发明专利]一种检测尿液中4-羟基-4-(3-吡啶基)丁酸的方法有效
申请号: | 201410013923.0 | 申请日: | 2014-01-13 |
公开(公告)号: | CN103776927A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 蒋举兴;者为;王文元;段焰青;夏建军;党立志;陈兴 | 申请(专利权)人: | 红云红河烟草(集团)有限责任公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 昆明协立知识产权代理事务所(普通合伙) 53108 | 代理人: | 谢嘉 |
地址: | 65020*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测尿液中4-羟基-4-(3-吡啶基)丁酸的方法。用Oasis MCX固相萃取小柱对尿液样品进行净化,对样品中的羧基进行甲酯化,对醇羟基进行mosher酯化,然后对衍生化以后的尿液样品进行HPLC-MS-MS检测,进而换算出尿样中(S)-4-羟基-4-(3-吡啶基)丁酸和(R)-4-羟基-4-(3-吡啶基)丁酸的浓度,然后计算两者的比例。该方法可以为评估个体对尼古丁、降烟碱、NNK和NNAL的代谢健康状况以及评价对烟气中这些物质的暴露程度提供一种科学的判定方法,具有检测限低、稳定性好、快速准确等优点,填补了这一技术领域的空白。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 尿液 羟基 吡啶 丁酸 方法 | ||
【主权项】:
一种检测尿液中4‑羟基‑4‑(3‑吡啶基)丁酸的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)配制含有(±)‑4‑羟基‑4‑(3‑吡啶基)丁酸和氘代(±)‑4‑羟基‑4‑(3‑吡啶基)丁酸‑d5的混合标准溶液,对羧基进行甲酯化衍生,对醇羟基进行Mosher衍生,然后对衍生化以后的混合标准溶液进行HPLC‑MS‑MS分析;(2)用普通健康吸烟人群尿样中(R)‑4‑mosher酯基‑4‑(3‑吡啶基)丁酸甲酯浓度远大于(S)‑4‑mosher酯基‑4‑(3‑吡啶基)丁酸甲酯的特性确定对应构型物质的色谱峰保留时间,采用内标法分别建立(S)‑4‑mosher酯基‑4‑(3‑吡啶基)丁酸甲酯和(R)‑4‑mosher酯基‑4‑(3‑吡啶基)丁酸甲酯的标准溶液工作曲线;(3)准确移取尿液样品于试管中,加入(±)‑4‑羟基‑4‑(3‑吡啶基)丁酸‑d5内标溶液和醋酸‑醋酸钠缓冲溶液,混匀后的尿液上样到活化好的Oasis MCX固相萃取小柱上进行净化,对样品中的羧基进行甲酯化衍生,对醇羟基进行Mosher衍生,然后对衍生化以后的尿液样品进行HPLC‑MS‑MS检测。
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