[发明专利]一种天然哺乳动物尿酸酶制备方法有效
申请号: | 201410015218.4 | 申请日: | 2014-01-10 |
公开(公告)号: | CN103756983A | 公开(公告)日: | 2014-04-30 |
发明(设计)人: | 张淳;范开;冯尚彩;刘兆明 | 申请(专利权)人: | 临沂大学 |
主分类号: | C12N9/06 | 分类号: | C12N9/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 276000 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 一种天然哺乳动物尿酸酶制备方法,所述方法包括如下步骤:(1)预处理:将新鲜哺乳动物肝脏均质破碎后,用pH值介于7.2-8.8之间的缓冲液洗涤,洗涤沉淀用pH值介于9.7-10.5之间的缓冲液溶解,得尿酸酶初提液;(2)粗纯化:将上述初提液进行硫酸铵分级沉淀及溶解,复溶液进行阴离子交换层析纯化,得尿酸酶粗纯品溶液;(3)精纯化:将上述尿酸酶粗纯品溶液进行亲和层析纯化,得纯度高于97.0%的尿酸酶纯品溶液。该制备方法未包含尿酸酶失活变性步骤、制备周期短、收率高,所得产品酶比活性高、纯度高,可用于天然或重组哺乳动物尿酸酶结构功能、理化性质及免疫原性研究。 | ||
搜索关键词: | 一种 天然 哺乳动物 尿酸酶 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种天然哺乳动物尿酸酶制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:1)预处理:将新鲜哺乳动物肝脏均质破碎后,用pH值介于7.2‑8.8之间的缓冲液洗涤,洗涤沉淀用pH值介于9.7‑10.5之间的缓冲液溶解,得尿酸酶初提液;2)粗纯化:将上述初提液进行硫酸铵分级沉淀,复溶缓冲液溶解,复溶液进行阴离子交换层析纯化,得尿酸酶粗纯品溶液;3)精纯化:将上述尿酸酶粗纯品溶液进行亲和层析纯化,得尿酸酶纯品溶液。
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