[发明专利]具有内化作用的酸敏感脂质体给药系统及其制备方法和应用

摘要

本发明属于医药技术中的药物制剂领域。公开了一种具有内化作用的酸敏感脂质体给药系统及其制备方法和应用。本发明将富有精氨酸残基的细胞穿透肽与脂质体表面长链有机酸直接偶联，结合具有酸敏感的聚乙二醇-腙键-长链有机酸偶合物，采用薄膜水化法制备了负载脂溶性药物和水溶性蒽醌类弱碱性药物的肿瘤靶向脂质体。其中，细胞穿透肽为多聚精氨酸短肽，优选GGRRRRRRRRR，聚乙二醇分子量为500Da～5000Da，优选2000Da，优化细胞穿透肽密度为磷脂的2％～8%，优选4%，聚乙二醇-腙键-长链有机酸酸偶合物的密度为磷脂的5％～20%，优选8％。本发明解决了目前脂质体细胞内化困难的问题，为抗肿瘤药物靶向亚细胞器提供了可能。本发明的给药系统基本无毒性，制备工艺简单，易于工业化应用。

主权项

一种具有内化作用的酸敏感脂质体给药系统，其特征在于细胞穿透肽通过长链有机酸直接偶联于脂质体表面，同时具有酸敏感性的聚乙二醇‑腙键‑长链有机酸偶联物修饰脂质体表面。其制备工艺包括如下步骤：(1)载药普通脂质体的制备：负载脂溶性药物的方法：适量磷脂、胆固醇及其衍生物、长链有机酸，脂溶性药物溶于有机溶剂，25～60℃下旋转蒸发成膜，等渗溶液水化即得；对于水溶性蒽醌类弱碱性药物的方法：适量磷脂、胆固醇及其衍生物、长链有机酸，溶于有机溶剂，旋转蒸发成膜，加入酸性(包括有机酸或无机酸)水溶液水化，然后再调节外水相为弱碱性pH7.5～8.0，加入水溶性蒽醌类弱碱性药物孵育过夜，即得。(2)具有内化作用脂质体制备：在步骤(1)得到的载药普通脂质体溶液中，加入适量1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCl)EDCl和巯基化‑N‑羟基丁二酰亚胺(s‑NHS)活化脂质体中的长链有机酸，调节pH为10～12，再加入CPP得到具有内化作用的CPP修饰脂质体，其中CPP修饰密度为磷脂物质的量的4％～8%，优选4％。(3)具有内化作用的算敏感脂质体的制备：加入聚乙二醇‑腙键‑长链有机酸，孵育过夜。其密度为磷脂物质的量的8％～20％，优选8%。(4)用截留分子量5000Da～300000Da的透析袋透析4h～48h或用截留分子量5000Da～300000Da的超滤管在4000g～15000g离心10min～30min，即得。优选截留分子量为10000Da，透析时间12h，离心速度为10000g，离心时间为20min。