[发明专利]一种人工培养难产孢病原真菌病害的简易诊断方法

摘要

本发明公开了一种人工培养难产孢病原真菌病害的简易诊断方法，该人工培养难产孢病原真菌病害的简易诊断方法包括以下步骤：选择用于获得病原菌的新鲜材料，装入洁净的自封袋内，带回实验室在15℃下放置12h～24h，制备添加链霉素或孟加拉红的清水琼脂；在体视显微镜下观察病部的真菌结构，找到优势类群并挑取孢子，转移到清水琼脂小方块上，按照单孢分离方法获得粘有单个孢子的琼脂块3个～5个；将琼脂块转移到添加适量抗细菌物质的PDA上培养直到长出菌落，得到一个确定形态的孢子对应的相应菌落；然后将这种培养物接种验证，通过发病部位的病原形态+分子数据信息（如ITS序列）共同鉴定病原物的种类。本发明方法简单，操作方便，提高了诊断植物真菌病害的效率和准确性。

主权项

一种人工培养难产孢病原真菌病害的简易诊断方法，其特征在于，该人工培养难产孢病原真菌病害的简易诊断方法包括以下步骤：步骤一，选择用于获得病原菌的材料，从田间采取具有典型症状的病样，装入洁净的自封袋内，带回实验室在15℃下放置12h～24h，制备添加链霉素或孟加拉红，链霉素终浓度为30μg/mL，孟加拉红终浓度为33ug/mL的清水琼脂；步骤二，在体视显微镜下观察典型症状部位的真菌结构，找到优势类群并挑取孢子，转移少量孢子到清水琼脂小方块上，然后用无菌的长针灸针或用细长的缝衣针制作的解剖针挑取单个孢子，按照单孢分离方法获得粘有单个孢子的琼脂块3个～5个；步骤三，将琼脂块转移到添加抗细菌物质的PDA上培养直到长出菌落，得到一个确定形态的孢子对应的相应菌落；步骤四，然后将培养物接种验证，通过发病部位的病原形态+分子数据信息（如ITS序列）共同鉴定病原物的种类。