[发明专利]一种响应面法优化浆水的制备方法

摘要

本发明涉及一种响应面法优化浆水的制备方法，该方法包括以下步骤：⑴蔬菜制备：分别将芹菜、莲花菜洗净后切段，并按等质量的比例放入罐中；⑵面汤制备：将面粉与水分别按不同水平梯度配制成面汤；⑶在放有蔬菜的罐中分别按不同的水平梯度加入面汤、混合菌发酵，即可得到对应于不同接种量、面粉/水和蔬菜/面汤的比例的浆水；⑷实验设计与统计分析：①单因素试验；②响应面法优化设计：根据单因素试验结果，以接种量、面粉/水和蔬菜/面汤的比例这3个因素，建立多元二次回归方程；⑸实验结果分析与优化：利用DesignExpert8.0软件进行绘图分析，得到回归方程的响应面及其等高线图。本发明操作简单、易于工业化生产。

主权项

1.一种响应面法优化浆水的制备方法，包括以下步骤：⑴蔬菜制备：分别将芹菜、莲花菜洗净后切段，并按等质量的比例放入罐中；⑵面汤制备：将面粉与温度为90~100℃的水分别按水平梯度为1kg：60mL、1 kg：80 mL、1 kg：100 mL的比例配制成面汤；⑶在放有所述蔬菜的罐中分别按为水平梯度为1 kg：20 mL，1 kg：30 mL，1 kg：40 mL的比例加入所述面汤，并分别按水平梯度为5%、7%、9%的接种量接入混合菌，在温度为20~40℃的条件下发酵4~6天，即可得到对应于不同接种量、面粉/水和蔬菜/面汤的比例的浆水；⑷实验设计与统计分析：①单因素试验：依次改变接种量、面粉/水和蔬菜/面汤的比例，以DPPH·清除率、活菌数、总酸为测定指标，然后按照下式计算其综合指标：其中：活菌数测定采用稀释平板法测定样品中活菌数，稀释度为10^-6、10^-8；每个稀释度做3个重复；将上述平板在30℃恒温培养箱培养24h，数菌落总数；酸度测定：称取25g试液，置于250ml三角瓶中，加40ml水及0.2ml1%的酚酞指示剂；用0.1mol/L氢氧化钠标准滴定溶液滴定至微红色30s不不退色，记录消耗0.1mol/L氢氧化钠标准滴定溶液的体积的数值，记作V₁，同一样品测定两次；空白试验：用水代替试液，按上述步骤操作，记录消耗0.1mol/L氢氧化钠标准滴定溶液的体积的数值，记作V₂；然后按下式计算总酸：式中：X——食品中总酸的质量分数以X计，数值以克每千克,g/kg(或g/L)表示；C——氢氧化钠标准滴定溶液的浓度，mol/L：V₁——滴定试液时消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，mL；V₂——空白试验时消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积，mL；F——试液的稀释倍数；K——酸的换算系数；其中各种酸的换算系数分别为：苹果酸0.067；乙酸0.060；酒石酸0.075；柠檬酸0.064；含一分子结晶水的柠檬酸0.070()；乳酸0.090；盐酸0.036；磷酸0.049；m ——试样的质量，g；DPPH·清除率的测定：首先精密称取DPPH·标准品8mg，置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，即得浓度为2×10^-4mol/L的DPPH·标准储备液，在4~10℃下低温避光保存备用；然后将所述储备液与甲醇按3mL：5mL的比例混合均匀后，即得工作液；其次，将甲醇与所述工作液按1mL：3mL的比例混合均匀后，利用紫外-可见分光光度法于517 nm处测定吸光度值，记为A_空白=0.681；最后，将发酵成熟的浆水与甲醇按1mL：3mL的比例混合均匀后，取10mL浆水在8000 r/min下离心10 min，得到上清液，该上清液与所述工作液按1mL：3mL的比例混合均匀后，常温避光反应20 min，于517 nm处测吸光度值记为A_样品，平行测定2次，按以下公式计算DPPH·清除率：；②响应面法优化设计：根据单因素试验结果，以接种量、面粉/水和蔬菜/面汤的比例这3个因素，利用Design Expert 8.0软件根据Box-Behnken设计原则进行实验设计，以面粉/水X₁、蔬菜/面汤X₂和接种量X₃为自变量，以综合指标为响应值y，建立多元二次回归方程：Y=69.08+3.30X₁+11.27 X₂+9.99 X₃+3.92 X₁ X₂+5.93 X₁ X₃-2.31 X₂ X₃-9.18 X₁²-4.43 X₂²-8.44 X₃²；⑸实验结果分析与优化：利用Design Expert 8.0软件根据多元二次回归方程进行绘图分析，得到回归方程的响应面及其等高线图。