[发明专利]鉴定菊花耐热相关差异蛋白的方法有效

专利信息
申请号: 201410032353.X 申请日: 2014-01-23
公开(公告)号: CN103776946A 公开(公告)日: 2014-05-07
发明(设计)人: 孙明;张杨;张启翔 申请(专利权)人: 北京林业大学
主分类号: G01N30/88 分类号: G01N30/88;G01N30/89
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君
地址: 100083 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明提供一种鉴定菊花耐热相关差异蛋白的方法,所述方法包括:分别对耐热的菊花品种和不耐热的菊花品种进行6h的热激处理,用TCA/丙酮沉淀法提取处理后的叶片蛋白样品;运用iTRAQ与质谱串联技术快速鉴定差异蛋白,并进行生物信息学分析。本发明针对菊花提供了一种快速准确鉴定菊花耐热相关差异蛋白的方法,为提高不耐热菊花的耐热性提供了研究基础,从而实现对菊花品种的改良。
搜索关键词: 鉴定 菊花 耐热 相关 差异 蛋白 方法
【主权项】:
一种鉴定菊花耐热相关差异蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)选择生长一致、无病虫害的耐热菊花品种和不耐热的菊花品种,分别对它们进行6h热激处理,同时将不进行热激处理的上述耐热菊花品种和不耐热的菊花品种作为对照,然后取热激处理组和对照组叶片,分别用TCA丙酮沉淀法提取蛋白;2)将四组蛋白样品分别进行定量、纯化和胰蛋白酶酶解,再分别用不同的iTRAQ同位素标签进行标记,去除残留标记试剂并脱盐后,混合四组样品,最后通过多维液相色谱分离和串联质谱联用采集数据,并对所得数据进行生物信息学分析,鉴定出菊花耐热相关差异蛋白。
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