[发明专利]一种基于免疫磁珠富集水体甲肝病毒的方法在审
| 申请号： | 201410037509.3 | 申请日： | 2014-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN103805574A | 公开（公告）日： | 2014-05-21 |
| 发明（设计）人： | 胡国良;乔煜婷;曹华斌;郭小权;张彩英 | 申请（专利权）人： | 江西农业大学 |
| 主分类号： | C12N7/02 | 分类号： | C12N7/02;C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 | 代理人： | 王守仁 |
| 地址： | 330045 江西省南*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于免疫磁珠富集水体甲肝病毒的方法，其包括如下步骤：制备富集甲肝病毒的特异性免疫磁珠；免疫磁珠富集甲肝病毒；定量检测甲肝病毒的富集效率。本发明构思合理，采用了免疫磁珠富集水体中甲肝病毒，突显了操作简便、特异性强、分离速度快、可重复性好，不需要昂贵的仪器设备等优点。另外，本发明在1mg的活化磁珠与75μg甲肝病毒单克隆抗体偶联时，可使病毒浓度为1.52×103拷贝/μl的300μl甲肝病毒水样富集效率最高达64.54%；使病毒浓度为1.52×106拷贝/μl的300μl甲肝病毒水样富集效率最高达91.45%。本方法对于富集水体中的甲肝病毒及其检测具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 免疫 富集 水体 甲肝 病毒 方法 | ||
【主权项】：
一种基于免疫磁珠富集水体甲肝病毒的方法，其特征在于采用包括以下步骤的方法：（1）制备富集甲肝病毒的特异性免疫磁珠：通过活化羧基磁珠，磁珠与甲肝病毒抗体偶联和封闭的步骤制备所述特异性免疫磁珠；（2）免疫磁珠富集甲肝病毒：将1mg制备的特异性免疫磁珠与300μl甲肝病毒吸附，室温孵育2小时；（3）定量检测甲肝病毒的富集效率：提取甲肝病毒RNA，反转录成cDNA；荧光定量PCR检测水体富集的甲肝病毒拷贝数；计算甲肝病毒富集效率。
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