[发明专利]一种检测TERT单核苷酸多态性的方法无效
申请号: | 201410042839.1 | 申请日: | 2014-01-28 |
公开(公告)号: | CN103923976A | 公开(公告)日: | 2014-07-16 |
发明(设计)人: | 吴松;蔡志明 | 申请(专利权)人: | 吴松;蔡志明 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 深圳市合道英联专利事务所(普通合伙) 44309 | 代理人: | 廉红果;谢成毅 |
地址: | 518000 广东省深圳市福田区笋*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明一种检测TERT单核苷酸多态性的方法,属于生物技术分子检测技术领域。该方法包括下述步骤:(1)、从样本的尿液和正常组织中分别提取DNA;(2)、针对需要检测的突变位点的不同,以从样本尿液和正常组织中提取的DNA为模板,分别以与突变位点相对应的引物对P1、P2或P3为引物,进行TaqMan Probe Real time PCR扩增;(3)、确定△Ctu与△Ctn之间的大小,当△Ctu-△Ctn<0尿液样品中存在突变位点;△Ctu-△Ctn≥0尿液样品中不存在突变位点。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 tert 核苷酸 多态性 方法 | ||
【主权项】:
一种检测TERT单核苷酸多态性的方法,包括下述步骤:(1)、从样本的尿液和正常组织中分别提取DNA;(2)、针对需要检测的突变位点的不同,以从样本尿液和正常组织中提取的DNA为模板,分别以与突变位点相对应的引物对P1、P2或P3为引物,进行TaqMan Probe Real time PCR扩增,其中与1,295,228G>A突变位点对应的引物对P1为:P1Fm:CGGGTCCCCGGCCCAGCCCCT,P1Rm:GCGCCGCGAGGAGAGGGCG;P1Fn:CGGGTCCCCGGCCCAGCCCCC,P1Rn:GCGCCGCGAGGAGAGGGCG;与1,295,250G>A突变位点对应的引物对P2为:P2Fm:CGCCCCGTCCCGACCCCTT,P2Rm:CGCCGCGAGGAGAGGGCG;P2Fn:CGCCCCGTCCCGACCCCTC,P2Rn:CGCCGCGAGGAGAGGGCG;与1,295,242‑1,295,243GG>AA突变位点对应的引物对P3为:P3Fm:CGTCCCGACCCCTCCCGGGTTT,P3Rm:GCGCCGCGAGGAGAGGGCG;P3Fn:CGTCCCGACCCCTCCCGGGTCC,P3Rn:GCGCCGCGAGGAGAGGGCG;(3)、确定△Ctu与△Ctn之间的大小,当△Ctu‑△Ctn<0尿液样品中存在突变位点;△Ctu‑△Ctn≥0尿液样品中不存在突变位点;其中△Ctu为尿液样品中突变引物与正常引物达到扩增阈值时的循环数的差值;△Ctn为正常组织样品中突变引物与正常引物达到扩增阈值时的循环数的差值。
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