[发明专利]一种纯化特利加压素的方法有效
申请号: | 201410051178.9 | 申请日: | 2014-02-14 |
公开(公告)号: | CN103992391A | 公开(公告)日: | 2014-08-20 |
发明(设计)人: | 路杨;杨东晖;周俊;周亮 | 申请(专利权)人: | 杭州诺泰制药技术有限公司 |
主分类号: | C07K7/16 | 分类号: | C07K7/16;C07K1/20 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 310018 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及一种纯化特利加压素的方法,其特征包括以下步骤:步骤1,将特利加压素粗品用水溶解,调节pH到3-4;步骤2,使用含有表面活性剂的离子对流动相A冲洗C18反相填料柱;步骤3,将步骤1溶液载入C18反相填料中;步骤4,梯度程序为:洗脱梯度的初始状态流动相B为5%,保持5min,然后60min内将流动相B比例增至30%,收集部分目的峰洗脱馏分;步骤5,纳滤膜脱盐后,经过冷冻干燥得到纯品特利加压素。 | ||
搜索关键词: | 一种 纯化 加压素 方法 | ||
【主权项】:
一种纯化特利加压素的方法,该方法使用C18反相填料,流动相采用含有表面活性剂的离子对试剂,可使成品特利加压素中的杂质[βAsp8]‑特利加压素含量降低到0.1 %以下,其特征在于,所述方法包括以下步骤: 步骤1,将特利加压素粗品用水溶解,调节pH到3‑4;步骤2,使用含有表面活性剂的离子对流动相A冲洗C18反相填料柱;步骤3,将步骤1溶液载入C18反相填料中;步骤4,梯度程序为:洗脱梯度的初始状态流动相B为5 %,保持5 min,然后60 min内将流动相B比例增至30 %,收集部分目的峰洗脱馏分;步骤5,纳滤膜脱盐后,经过冷冻干燥得到纯品特利加压素;其中,C18反相填料柱为(10 μm,50 mm ×250 mm);流动相A:5 mmol/L磷酸二氢铵+25 mmol/L 表面活性剂(使用磷酸调pH:3‑4); 流动相B:乙腈;梯度程序为:初始状态流动相B为5 %,保持5 min,然后60 min内将流动相B比例增至30 %,收集部分目的峰洗脱馏分;流速为:80 mL/min;检测波长为220 nm。
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