[发明专利]一种高通量快速提取蔬菜单粒种子DNA的方法在审
申请号: | 201410051556.3 | 申请日: | 2014-02-14 |
公开(公告)号: | CN104845963A | 公开(公告)日: | 2015-08-19 |
发明(设计)人: | 赵新;刘莉莉;王永;王超楠;兰青阔;李梅;陈锐;朱珠;郭永泽;景海春 | 申请(专利权)人: | 天津市农业质量标准与检测技术研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300381 天津市南*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种高通量快速提取蔬菜单粒种子DNA的方法,它是将种子破壳发育至初期幼苗的单株,利用手持式电动破碎仪将待测单株样品在1.5mL尖底儿离心管中研磨至粉末,然后加入100μL10%Chelex-100溶液,65℃水浴20min,迅速冰上冷冻10min,13200rpm/min,离心3min,吸取上清即为样品DNA,可直接用于PCR扩增。本发明采用的DNA提取方法,35分钟就可以完成样品DNA提取的全过程。所提取的DNA质量标准满足了后续PCR扩增的要求,更适合于育种产业品种选育、纯度鉴定过程中高通量快速提取样品DNA的目的,具有高效、快速、低成本、操作简便等优势。 | ||
搜索关键词: | 一种 通量 快速 提取 蔬菜 种子 dna 方法 | ||
【主权项】:
一种高通量快速提取蔬菜单粒种子DNA的方法,其特征在于它按如下步骤进行:(1)取待测植物样本100mg加入1.5mL灭菌离心管中,利用手持式电动破碎仪研磨至粉末;(2)加入100μL10%Chelex‑100溶液,涡旋充分混匀,置于65℃水浴锅中恒温水浴20min;(3)水浴后迅速冰上冷冻10min,13200rpm/min,离心3min,取上清,保存,用于后续PCR扩增。
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