[发明专利]一种P2X7-PANX1双表达载体、稳定系细胞、制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种P2X₇-PANX1双表达载体、稳定系细胞、制备方法及应用，属于生物技术领域。本发明先构建pP2X₇-EGFP过表达载体和pPANX1-RFP过表达载体，再将两个独立的基因表达调控框整合于一个表达载体上，成功构建pP2X₇-PANX1双表达载体，能实现一次转染携带两个不同的基因，并且利用各自的荧光筛选标记实现稳定系的筛选。其中，双转染P2X₇和PANX1的HEK细胞株具有以下特点：双转染细胞上P2X₇基因被绿色荧光蛋白基因EGFP标记，该融合蛋白可用于对P2X₇的示踪，通过监测GFP荧光即可实现对P2X₇表达的鉴定；（2）双转染细胞上PANX1基因同红色荧光蛋白基因进行融合，该融合蛋白既具有PANX1通道的功能，又具有红色荧光，通过监测RFP荧光即可实现对PANX1定位和表达的测定。

主权项

一种P2X₇‑PANX1双表达载体，其特征在于：含有如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。