[发明专利]一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的方法无效
| 申请号： | 201410057026.X | 申请日： | 2014-02-15 |
| 公开（公告）号： | CN103837615A | 公开（公告）日： | 2014-06-04 |
| 发明（设计）人： | 宋雯雯;段方猛 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266109 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的方法，其步骤包括：a、采用YMC250×4.6mm，S-5μm色谱柱；b、采用甲醇-水的流动相进行梯度洗脱；c、流速：1.0mL／min，进样量：20μL，柱温：38℃；d、波长：260nm，扫描波长：200-600nm。本发明操作简便，分离快速，灵敏度高，无需更换色谱柱，而且结果稳定性好、重复性高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 应用 高效 色谱 同时 测定 植物 蜕皮 激素类 物质 方法 | ||
【主权项】：
一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)分别制备20‑羟基蜕皮甾酮、α‑蜕皮甾酮、2‑脱氧‑20‑羟基蜕皮甾酮和7‑脱氢胆固醇的标准溶液和混合标准溶液；(2)取上述制备的标准液母液，按照倍比稀释的方法，配成5种浓度，稀释溶剂为甲醇，经0.45μM微孔滤膜过滤后，各取20μL进样分析；(3)进行高效液相色谱分析：实验仪器：美国沃特世液相色谱仪的系统：四元输液泵P4000、在线真空脱气机、全自动进样器AS1000、二极管阵列检测器UV6000LP；色谱条件：采用YMC250×4.6mm，S‑5μm色谱柱；采用甲醇‑水的流动相进行梯度洗脱，梯度洗脱程序为0‑30min，甲醇30％→95％；30‑40min，甲醇95％→100％；40‑60min，甲醇100％；60‑65min，甲醇100％→30％；65‑70min，甲醇30％；流速：1.0mL／min，进样量：20μL，柱温：38℃；波长：260nm，扫描波长：200‑600nm；(4)定性定量分析将上述5种倍比浓度的20‑羟基蜕皮甾酮、α‑蜕皮甾酮、2‑脱氧‑20‑羟基蜕皮甾酮和7‑脱氢胆固醇的混合标准溶液进样检测，每个浓度进样3次，进行相关性回归分析。
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