[发明专利]一种代谢工程改造大肠杆菌产圣草酚的方法有效
| 申请号： | 201410076587.4 | 申请日： | 2014-03-04 |
| 公开（公告）号： | CN103865864A | 公开（公告）日： | 2014-06-18 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;周景文;朱赛杰;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P17/06;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 何自刚;王玉松 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种代谢工程改造大肠杆菌产圣草酚的方法，属于代谢工程领域。本发明通过基因工程技术，在大肠杆菌中将截去膜结合序列的黄酮3’羟化酶基因tF3’H和P450还原酶基因tCPR两个基因融合表达，成功实现了柚皮素转化圣草酚的步骤。同时表达来自R.glutinis的酪氨酸解氨酶基因TAL，P.crispum的4-香豆酸：辅酶A连接酶基因4CL，P.hybrida的査尔酮合成酶基因CHS和M.sativa的查尔酮异构酶基因CHI实现由酪氨酸直接生产柚皮素，从而构建得到由酪氨酸直接生产圣草酚的工程菌株。为进一步提高圣草酚产量，本发明敲除了大肠杆菌基因组中的乙酸激酶ackA基因，并过量表达乙酰辅酶A合成酶基因acs和乙酰辅酶A羧化酶基因ACC，最终圣草酚的产量可达106.7mg/L。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 代谢 工程 改造 大肠杆菌 产圣草酚 方法 | ||
【主权项】：
一种以酪氨酸为底物合成圣草酚的大肠杆菌基因工程菌，其特征在于，在大肠杆菌内构建了由酪氨酸合成柚皮素的途径，并融合表达了截去膜结合序列的黄酮3’羟化酶基因tF3’H和P450还原酶基因tCPR以实现由柚皮素向圣草酚转化的途径。
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