[发明专利]一种基于质粒库的无引物基因合成方法有效
| 申请号： | 201410079262.1 | 申请日： | 2014-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN103952396A | 公开（公告）日： | 2014-07-30 |
| 发明（设计）人： | 马立新;陈晚苹 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C40B50/06;C40B40/02 |
| 代理公司： | 武汉金堂专利事务所 42212 | 代理人： | 丁齐旭 |
| 地址： | 430062 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提出了一种基于质粒库的无引物基因合成方法，该方法通过构建一个包含有16384（47，7bp的四个碱基的任意组合序列）个质粒的质粒库，从已构建好的含有7个bp的质粒出发，将选定目标基因按照每82bp进行划分，通过酶切酶连操作依次进行四种抗性基因Kana、cam、gem、spc的重构，得到若干82bp的质粒，然后再把这些82bp质粒组装合成长片段基因。本发明构建好含有16384（47，7bp的四个碱基的任意组合序列）个质粒的质粒库后，无需任何引物，能合成各种目标基因。本发明操作简单，突变率极低，无需测序，成本低，筛选量少，有利于构建突变体文库，可以实现溶液操作，便于实现自动化。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 质粒 引物 基因 合成 方法 | ||
【主权项】：
一种基于质粒库的无引物基因合成方法，其特征在于该方法通过构建一个包含有7bp的A、T、C、G四个碱基的任意组合序列的16384（47 ）个质粒的质粒库，从已构建好的含有7个bp的质粒出发，将选定的目标基因按照每82bp进行划分，通过酶切酶连操作依次进行Kana、cam、gem、spc四种抗性基因的重构，得到若干含82bp的质粒， 然后再把这些82bp质粒组装合成长片段基因。
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